Anticorps monoclonal anti-Villin1 pour WB, IHC-P, ELISA - P09327

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Villin1

• Villin-1 (VIL, D2S1471) est une protéine de modification de l'actine régulée par le Ca2+, spécifique des cellules épithéliales, qui module la réorganisation de l'actine des microvillosités.
• Elle présente de multiples activités de régulation de l'actine : nucléation, assemblage en faisceaux, coiffement et clivage, régulées par la liaison du Ca2+, du PIP2 et du LPA.
• La liaison au LPA améliore la phosphorylation médiée par SRC et inhibe les activités de modification de l'actine, tandis que le PIP2 inhibe le coiffage / le clivage mais favorise l'assemblage en faisceaux.
• Villin-1 régule la morphologie, la migration, l'invasion et l'apoptose des cellules épithéliales ; elle protège contre l'apoptose induite par le DSS en préservant l'intégrité mitochondriale.
• Elle améliore la motilité des cellules épithéliales induite par le HGF, la chimiotaxie et la réparation des plaies.
• Pendant l'infection par S. flexneri, son activité de clivage de l'actine facilite le mouvement intracellulaire et la dissémination bactérienne.
• Subcellulairement, elle est localisée dans le cytoplasme, le cytosquelette et les projections riches en actine : extrémités des microvillosités, lamellipodes, crêtes et filopodes.
• Spécificité tissulaire : composant principal des microvillosités des épithéliums intestinaux et des tubules proximaux rénaux ; également exprimée dans les microvillosités canaliculaires des hépatocytes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est une protéine recombinante de Villin1 humaine ; l'anticorps monoclonal obtenu peut reconnaître des épitopes linéaires et conformationnels, ce qui permet son utilisation dans des applications dénaturantes (WB) comme natives (IHC, ELISA).
• Pour le Western blot, un SDS-PAGE réducteur est recommandé ; on attend une bande principale à ~93 kDa. Validez la spécificité en utilisant des contrôles positifs (par exemple, lysats de cellules épithéliales intestinales ou rénales) et des lignées cellulaires de contrôle négatif.
• Pour l'immunohistochimie sur coupes de paraffine, des méthodes de récupération d'antigène (par exemple, tampon citrate, pH 6,0) peuvent être nécessaires ; validez sur des tissus à forte expression de Villin1 comme l'intestin grêle ou le rein.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec les Villin1 de souris et de rat, ce qui permet son utilisation dans des modèles de rongeurs ; confirmez la réactivité spécifique à l'espèce en comparant avec des profils d'expression connus.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser cet anticorps comme réactif de capture ou de détection avec la Villin1 recombinante ou des extraits cellulaires / tissulaires ; associez-le à un autre anticorps anti-Villin1 ne présentant pas de chevauchement si disponible.

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