Anticorps polyclonal de lapin anti-VEGFR1 pour WB, IHC-P, ELISA - P17948

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du VEGFR1

• Le VEGFR1 (FLT-1) est un récepteur tyrosine kinase membre de la famille des VEGFR, codé par le gène FLT1. Il existe sous plusieurs isoformes, dont une forme entière liée à la membrane et des variants solides sécrétés (isoformes 2 et 3) générés par épissage alternatif.
• Il agit comme récepteur de haute affinité pour VEGFA, VEGFB et PGF, et régule de façon critique le développement vasculaire embryonnaire et l'angiogenèse postnatale. Il peut à la fois promouvoir la survie et la prolifération des cellules endothéliales, et fonctionner comme récepteur leurre pour moduler négativement la signalisation du VEGFA en séquestrant le ligand libre.
• La liaison du ligand active plusieurs voies de signalisation en aval, notamment les cascades de signalisation PLCG-PKC, PI3K-AKT1 et MAPK. Il phosphoryle des médiateurs clés tels que SRC, YES1, CBL et PTK2/FAK1, et induit la phosphorylation d'AKT1 sur le résidu Ser-473. Références associées : PMID:16685275
• Au niveau sous-cellulaire, le VEGFR1 est principalement localisé sur la membrane plasmique, mais il est également détecté dans les endosomes, le cytoplasme et sous forme d'isoformes sécrétées, ce qui reflète son trafic dynamique et sa polyvalence de signalisation.
• Il est largement exprimé dans les cellules endothéliales vasculaires et des tissus tels que le placenta, le foie, le rein, le cœur et le cerveau. L'isoforme 2 est abondante dans le placenta, tandis que l'isoforme 3 se trouve dans les cellules épithéliales cornéennes et les cellules musculaires lisses vasculaires.
• La protéine subit de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation N-liée, la formation de ponts disulfures et la phosphorylation, qui sont essentielles à sa fonction. Les mots-clés UniProt soulignent ses rôles dans l'angiogenèse, la chimiotaxie et le développement.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à la région extracellulaire (acides aminés 20-300) du VEGFR1 humain, ce qui indique une réactivité à la fois avec les isoformes liées à la membrane et les isoformes solubles. Effectuez une validation appropriée de l'épitope dans votre système expérimental.
• Pour le Western Blot, le poids moléculaire attendu est d'environ 151 kDa ; cependant, la glycosylation peut entraîner un décalage de la bande. Validez la spécificité à l'aide de contrôles appropriés (par exemple, peptide de blocage ou lysats de knock-down).
• En immunohistochimie (IHC-P), des méthodes robustes de récupération d'antigène sont recommandées pour les tissus fixés au formol et inclus en paraffine. Commencez par des protocoles standards à base de citrate ou d'EDTA et optimisez les conditions de détection.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection. Titrez l'anticorps pour déterminer les concentrations de travail optimales et effectuez une validation croisée avec des paires d'anticorps complémentaires pour les formats sandwich.
• Compte tenu de la réactivité croisée avec la souris et le rat, l'anticorps est adapté aux études translationnelles, mais confirmez la performance spécifique à l'espèce avec les contrôles positifs et négatifs appropriés.

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