Anticorps monoclonal de lapin anti-VCP pour WB, IF/ICC, ELISA - P55072

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du VCP

• ATPase du réticulum endoplasmique transitionnel (également désignée p97 ou VCP) qui fonctionne comme un chaperon et une ségrégase homohexamérique dans diverses voies cellulaires.
• Centrale pour le système ubiquitine-protéasome : le complexe UFD1-VCP-NPLOC4 se lie aux protéines mal repliées ubiquitinylées et les exporte du RE pour une dégradation cytosolique.
• Essentielle pour la dynamique de l'appareil de Golgi : nécessaire à la fragmentation mitotique et au réassemblage post-mitotique des empilements de Golgi, et facilite le bourgeonnement des vésicules à partir du RE transitionnel.
• Recrutée sur les cassures double-brin de l'ADN de manière dépendante de RNF8/RNF168, favorisant l'accumulation de TP53BP1 et contribuant à la réparation de l'ADN. (PubMed:22020440, PubMed:22120668) Références associées : PMID:22020440 PMID:22120668
• Essentielle pour l'autophagie : requise pour la maturation des autophagosomes contenant de l'ubiquitine et médie l'extraction de G3BP1 des granules de stress pour éliminer les agrégats. (PubMed:20104022, PubMed:27753622, PubMed:38762759, PubMed:29804830, PubMed:34739333) Références associées : PMID:20104022 PMID:27753622 PMID:38762759 PMID:29804830 PMID:34739333
• Régule négativement la production d'interféron de type I en interagissant avec RIGI ubiquitinylé, recrutant RNF125 pour promouvoir la dégradation de RIGI. (PubMed:26471729) Références associées : PMID:26471729
• Localisation subcellulaire : Présente dans le cytoplasme, le cytosol, le réticulum endoplasmique, le noyau et les granules de stress, ce qui est cohérent avec ses rôles multifonctionnels.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 1-100 du VCP humain (P55072). Cette région N-terminale devrait générer un anticorps reconnaissant le VCP de pleine longueur (~89 kDa) en western blot dénaturant.
• Pour le WB, utilisez des conditions réductrices standards ; le poids moléculaire prédit est de 89 kDa, mais des modifications post-traductionnelles peuvent entraîner de légers décalages. Validez le chargement avec des contrôles appropriés.
• Pour l'IF/ICC, les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées ; l'anticorps devrait détecter le VCP dans ses localisations rapportées (cytoplasme, RE, noyau, granules de stress).
• En ELISA, cet anticorps peut être utilisé pour la détection sensible du VCP recombinant ou natif ; envisagez de le combiner avec un anticorps de détection pour des tests en sandwich.
• La réactivité croisée avec le VCP de souris et de rat a été démontrée, le rendant adapté aux études sur ces espèces ; néanmoins, effectuez une validation spécifique à l'espèce dans votre système modèle.
• Comme pour tout anticorps monoclonal, la cohérence d'un lot à l'autre est typique, mais effectuez toujours un titrage et une validation dans le contexte spécifique de votre application en utilisant des contrôles positifs et négatifs.

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