Anticorps monoclonal anti-VCAM-1/CD106 pour FC - P29533

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de VCAM-1/CD106

• VCAM-1 (Molécule d'adhésion cellulaire vasculaire 1), également connue sous le nom de CD106, est une glycoprotéine d'adhésion cellulaire codée par le gène Vcam1. Elle est principalement exprimée à la surface des cellules endothéliales et joue un rôle crucial dans la surveillance immunitaire et l'inflammation.
• En tant que régulateur majeur de l'adhésion des leucocytes à l'endothélium, VCAM-1 médie l'adhésion ferme des lymphocytes, monocytes, éosinophiles et basophiles à l'endothélium vasculaire via l'interaction avec des intégrines (par exemple, VLA-4/α4β1).
• Lors des réponses inflammatoires, la liaison de VCAM-1 aux intégrines des leucocytes déclenche des cascades de signalisation intracellulaires, incluant l'activation des canaux calciques et de la petite GTPase RAC1, favorisant la migration transendothéliale des cellules immunitaires.
• VCAM-1 sert également de point de contrôle de qualité pour l'entrée dans la moelle osseuse en fournissant un signal "ne me mange pas" dans le contexte de la présentation du CMH de classe I, empêchant la phagocytose des cellules hématopoïétiques viables.
• La protéine existe sous plusieurs isoformes dues à l'épissage alternatif ; la forme canonique est une protéine transmembranaire d'environ 81 kDa, bien qu'une forme soluble de 38 kDa puisse être générée par clivage ou épissage alternatif.
• Au niveau subcellulaire, VCAM-1 est localisée à la membrane cellulaire et peut être libérée sous forme sécrétée ; elle est fortement exprimée sur l'endothélium vasculaire enflammé ainsi que sur des types cellulaires de type macrophage et cellules dendritiques dans les tissus normaux et enflammés, et dans la moelle osseuse.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation, la formation de ponts disulfure et l'ubiquitination ; la protéine contient des domaines de type immunoglobuline et une hélice transmembranaire, la classant comme membre de la superfamille des immunoglobulines.
• Dans des conditions physiologiques, l'expression de VCAM-1 est induite par des cytokines telles que le TNF-α et l'IL-1, et sa régulation à la hausse est une caractéristique des maladies inflammatoires, en faisant une cible précieuse pour la recherche diagnostique et thérapeutique.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à la région extracellulaire N-terminale (acides aminés 25-310), qui inclut le premier domaine de type immunoglobuline impliqué dans la liaison aux intégrines ; cette conception favorise la reconnaissance de l'épitope extracellulaire natif sur les cellules vivantes, adapté à la cytométrie en flux sans perméabilisation.
• est un colorant fluorescent rouge vif ; lors de la conception de panels multicolores, évitez le chevauchement spectral avec le PE, le Texas Red et des fluorophores similaires. Pensez à utiliser des contrôles de compensation appropriés.
• Pour la cytométrie en flux, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration optimale pour une coloration spécifique sur des lignées cellulaires de souris ou des cellules primaires exprimant VCAM-1, telles que les cellules endothéliales bEnd.3 traitées au TNF-α ou les macrophages dérivés de moelle osseuse.
• Un colorant de viabilité mort/vivant est recommandé pour exclure les cellules mortes, car les cellules endommagées peuvent présenter une liaison non spécifique. Incluez un contrôle isotype ou un blocage Fc pour minimiser le bruit de fond.
• La réactivité croisée est confirmée pour la souris ; les performances sur d'autres espèces ne sont pas garanties. Si vous l'utilisez sur des tissus, validez avec des contrôles positifs et négatifs appropriés.

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