Anticorps polyclonal de lapin anti-USP9X/USP9Y pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O00507

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l'USP9X/USP9Y

• USP9Y, également connue sous les noms d'hydrolase 9Y de l'extrémité carboxyle de l'ubiquitine, d'enzyme de désubiquitination FAF-Y ou de protéine apparentée aux protéines Fat facets liée au chromosome Y, appartient à la famille des protéases spécifiques de l'ubiquitine (USP).
• Codée par le gène USP9Y (anciennement DFFRY) situé sur le chromosome Y, elle agit comme une désubiquitinase qui clive l'ubiquitine des protéines substrats et joue un rôle dans la voie ubiquitine-protéasome. Il est proposé qu'elle stabilise des protéines importantes pour la spermatogenèse et la fertilité masculine. Références associées : PMID:12895410
• Elle est largement exprimée dans les tissus embryonnaires et adultes.
• Ses principales caractéristiques structurales comprennent un domaine de liaison au zinc typique des protéases à thiol, et la protéine est soumise à la phosphorylation et à l'épissage alternatif.
• La protéine mature possède un poids moléculaire d'environ 291 kDa.
• La séquence immunogène de l'anticorps (acides aminés 2456-2555) est commune à USP9Y et à son homologue sur le chromosome X, USP9X, ce qui permet de détecter les deux protéines.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le Western blot, prévoir une bande autour de 291 kDa. Utiliser un gel de polyacrylamide à faible pourcentage (par exemple 6-8 %) et prolonger les temps de transfert afin d'assurer un transfert efficace des protéines de haut poids moléculaire.
• Valider la spécificité de l'anticorps dans votre système d'échantillonnage en utilisant une inhibition par siRNA ou des lignées cellulaires présentant des niveaux d'expression connus d'USP9X/USP9Y.
• Envisager des expériences de blocage par peptide avec la séquence immunogène afin de confirmer l'identité de la bande.
• Pour l'IHC-P, optimiser les conditions de récupération antigénique (par exemple, récupération d'épitope induite par la chaleur avec un tampon citrate ou EDTA) et tester différentes dilutions de l'anticorps.
• Pour l'IF/ICC, utiliser des protocoles de fixation et de perméabilisation adaptés à la localisation subcellulaire d'USP9X/USP9Y.
• Comme il s'agit d'un anticorps polyclonal, la constance entre les lots peut varier ; évaluer les nouveaux lots par rapport à un standard de référence.

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