PAb de Lapin Anti-USP8 pour WB, IF/ICC, ELISA - P40818

Spécifications et paramètres de base du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'USP8

• L'USP8, également connue sous le nom d'ubiquitine carboxyl-terminale hydrolase 8, est une enzyme de déubiquitination qui élimine l'ubiquitine conjuguée des protéines substrats, régulant ainsi la stabilité et le renouvellement des protéines.
• Elle hydrolyse les chaînes polyubiquitine liées à la fois par Lys-48 et Lys-63, et son activité catalytique est améliorée pendant la phase M, la reliant à la régulation du cycle cellulaire (Mots-clés : Cycle cellulaire, Phosphoprotéine).
• L'USP8 joue un rôle essentiel dans le tri endosomal et le trafic membranaire en contrôlant la dynamique de l'ubiquitine sur les endosomes précoces. Elle déubiquitine l'EPS15 et maintient la stabilité de l'ESCRT-0, préservant ainsi la morphologie endosomale.
• Dans la signalisation des facteurs de croissance, l'USP8 élimine l'ubiquitine du récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR), modulant la dégradation du récepteur et l'activité de la voie MAPK en aval.
• L'USP8 déubiquitine la BACE1, inhibant sa dégradation lysosomale et affectant le traitement de la protéine précurseur amyloïde (APP) et la formation d'amyloïde-bêta. Références associées : PMID:27302062
• De plus, l'USP8 est impliquée dans la régulation de l'anergie des lymphocytes T par formation de complexes avec RNF128 et OTUB1, et contribue à la biogenèse de l'acrosome pendant la spermatogenèse.
• Subcellulairement, l'USP8 se localise dans le cytoplasme, le noyau, la membrane endosomale et la membrane cellulaire, reflétant ses divers rôles fonctionnels.
• Les mutations de l'USP8 sont associées au syndrome de Cushing et à d'autres troubles, soulignant son importance clinique (Mots-clés : Variante de maladie, Syndrome de Cushing).

Conseils expérimentaux et techniques

• L'antigène couvre la région N-terminale (aa 1-270) de l'USP8 humaine, qui peut reconnaître plusieurs isoformes en raison de l'épissage alternatif. Vérifiez la spécificité de l'isoforme dans votre système expérimental.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande majeure autour de 128 kDa dans des conditions réductrices. Validez le poids moléculaire observé par rapport à des contrôles connus et envisagez d'utiliser un gel à faible pourcentage pour une séparation optimale des protéines de haut poids moléculaire.
• En IF/ICC, l'USP8 présente une localisation subcellulaire dynamique. Incluez des étapes de perméabilisation et de blocage appropriées ; une co-coloration avec des marqueurs d'organites (par exemple, EEA1 pour les endosomes précoces) est recommandée.
• Pour ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection, mais les concentrations optimales doivent être déterminées empiriquement pour chaque format d'essai.
• Cet anticorps montre une réactivité croisée confirmée avec l'USP8 murin et de rat. Lors de travaux avec des modèles rongeurs, incluez toujours des contrôles positifs et négatifs adaptés à l'espèce pour confirmer la spécificité.

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