Anticorps polyclonal de lapin anti-USP30 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q70CQ3

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'USP30

• USP30 (hydrolase ubiquitine carboxyl-terminale 30) est une enzyme de déubiquitination également connue sous le nom de déubiquitinase 30, thioestérase ubiquitine 30 et protéase de traitement spécifique à l'ubiquitine 30, codée par le gène USP30.
• Ancrée à la membrane externe des mitochondries, l'USP30 agit comme un inhibiteur clé de la mitophagie en contrecarrant l'action de la parkine (PRKN) ; elle hydrolyse l'ubiquitine attachée par la parkine sur les protéines cibles telles que RHOT1/MIRO1 et TOMM20, bloquant ainsi la capacité de la parkine à entraîner la mitophagie. Références connexes : PMID:18287522 PMID:24896179 PMID:25527291
• Clive préférentiellement les chaînes de polyubiquitine liées par « Lys-6 » et « Lys-11 », deux types de liaisons impliquées dans la signalisation mitophagique ; ne clive pas efficacement les polyubiquitines phosphorylées sur « Ser-65 ». Références connexes : PMID:25621951 PMID:25527291
• Régule négativement la fusion mitochondriale en médiant la déubiquitination de MFN1 et MFN2.
• Localisation subcellulaire : membrane externe de la mitochondrie ; contient une hélice transmembranaire.
• Spécificité tissulaire : exprimé dans le muscle squelettique, le pancréas, le foie et le rein.
• Appartient à la famille des peptidases C19 ; classée comme une protéase à thiols et une hydrolase impliquée dans la voie de conjugaison à l'ubiquitine.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 57-390 de l'USP30 humaine, englobant le domaine catalytique ; tenez compte de la conservation de cette région lors de l'évaluation de la réactivité chez la souris et le rat.
• Pour le Western blot, une bande autour de 59 kDa est attendue ; validez la taille de la bande détectée dans votre système d'échantillon spécifique, car les modifications post-traductionnelles peuvent modifier la migration.
• En immunofluorescence/ICC, un marquage de la membrane externe des mitochondries est à prévoir ; un contre-marquage avec un marqueur mitochondrial est recommandé pour confirmer la localisation.
• Pour les applications ELISA, optimisez les conditions de revêtement et les dilutions d'anticorps en utilisant une protéine standard USP30 recombinante si disponible.
• Lors de l'étude de la régulation de la mitophagie, envisagez une manipulation pharmacologique ou génétique concomitante de la parkine pour évaluer l'activité de déubiquitinase de l'USP30 dans votre modèle.

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