Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-ULK4 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q96C45

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'ULK4

• ULK4 est une pseudokinase appartenant à la famille des kinases de type Unc-51, également connue sous les noms FAM7C1 et REC01035, et se caractérise par un manque d'activité catalytique kinase, fonctionnant plutôt comme un adaptateur moléculaire.
• Dans la voie de signalisation hedgehog, ULK4 agit au niveau du cil primaire pour médier l'association entre la kinase STK36 et le facteur de transcription GLI2, favorisant la phosphorylation de GLI2 et sa libération ultérieure de l'inhibition par SUFU, permettant ainsi la translocation nucléaire de GLI2 et l'activation des gènes cibles. Références associées : PMID:38096226
• ULK4 est localisée dans les projections cellulaires, spécifiquement le cil, ce qui est cohérent avec son rôle dans la transduction du signal hedgehog ciliaire.
• Au niveau protéique, l'expression d'ULK4 est principalement détectée dans le cerveau, en particulier dans les neurones postmitotiques, y compris les neurones GABAergiques, et est absente dans les astrocytes.
• La protéine possède un domaine de liaison à l'ATP et une capacité de liaison aux nucléotides, bien que sa classification en tant que pseudokinase implique une utilisation nucléotidique non canonique.
• Elle contient plusieurs régions répétées et est sujette à la phosphorylation, comme l'indique l'identification par protéomique, suggérant des modifications post-traductionnelles régulatrices.
• La fonction d'adaptateur d'ULK4 dans l'activation de GLI2 est cruciale pour une signalisation hedgehog appropriée, qui régit le développement embryonnaire, le maintien des cellules souches et la régénération tissulaire.

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• Pour le Western blot, étant donné le poids moléculaire élevé d'ULK4 (environ 142 kDa), envisagez d'utiliser un gel de polyacrylamide à faible pourcentage (par exemple, 6-8 %) avec des temps de transfert prolongés pour assurer un transfert protéique efficace.
• En immunofluorescence ou immunocytochimie, comme ULK4 se localise aux cils, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation pour préserver les structures ciliaires, et confirmez la co-localisation avec des marqueurs ciliaires tels que la tubuline acétylée ou Arl13b.
• Validez la spécificité de l'anticorps dans votre système d'échantillonnage en incluant des lignées cellulaires ou des tissus connus pour exprimer ULK4 (par exemple, des cultures neuronales ou des coupes de cerveau) et en réalisant des contrôles de knockdown/knockout lorsque cela est possible.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre peut varier ; nous recommandons de titrer chaque nouveau lot et d'inclure des contrôles positifs et négatifs appropriés dans chaque expérience.
• Pour les applications ELISA, assurez-vous que l'immunogène recombinant ou la protéine ULK4 pleine longueur est utilisée pour le revêtement afin de confirmer la réactivité et de déterminer les dilutions de travail optimales.

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