Anticorps monoclonal anti-ULK3 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q6PHR2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ULK3

• L'ULK3 (Unc-51-like kinase 3) est une sérine/thréonine protéine kinase qui agit comme un régulateur clé de la signalisation « smoothened » dans la voie hedgehog et l'initiation de l'autophagie. Références associées : PMID:19279323 PMID:19878745 PMID:20643644 PMID:31279575

• En présence de ligands hedgehog (DHH, IHH, SHH), l'ULK3 s'autophosphoryle et phosphoryle GLI2 (et dans une moindre mesure GLI1 et GLI3), favorisant leur dissociation du SUFU, leur translocation nucléaire et leur activation transcriptionnelle. Références associées : PMID:19878745 PMID:20643644 PMID:31279575

• En l'absence de ligand hedgehog, l'ULK3 interagit avec le SUFU, ce qui inactive son activité kinase et empêche la phosphorylation de la protéine GLI, assurant ainsi la répression de la voie. Références associées : PMID:20643644

• Au-delà de la signalisation hedgehog, l'ULK3 induit l'autophagie en réponse à la sénescence cellulaire, la reliant au contrôle de la qualité cellulaire et au vieillissement. Références associées : PMID:19279323

• L'ULK3 est principalement localisé dans le cytoplasme et est largement exprimé dans tous les tissus, avec des niveaux les plus élevés dans le cerveau fœtal et adulte, le foie et les reins ; au sein du système nerveux, il est particulièrement abondant dans l'hippocampe.

• La protéine contient des domaines kinases, des sites de liaison à l'ATP et subit un épissage alternatif ; elle est classée dans la famille des sérine/thréonine-protéine kinases et est une phosphoprotéine connue.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 373–472 de l'ULK3 humain, une région située dans le domaine kinase. Les chercheurs peuvent prendre en compte cet emplacement de l'épitope lors de la conception de réactifs de détection complémentaires.
• Cet anticorps a été testé en WB, IF/ICC et ELISA. Pour l'immunobuvardage (Western Blot), la bande attendue est d'environ 53 kDa ; des isoformes potentielles issues de l'épissage alternatif peuvent apparaître à des tailles différentes et doivent être validées dans le système d'échantillonnage pertinent.
• Compte tenu de la réactivité croisée avec l'humain et la souris, une expérience pilote avec des contrôles positifs et négatifs appropriés est recommandée pour confirmer la spécificité avant toute étude à grande échelle.
• Pour les applications en IF/ICC, les méthodes de fixation et de perméabilisation cellulaire doivent être soigneusement optimisées, car l'ULK3 est une protéine cytoplasmique.
• L'activité kinase et l'activation de la voie peuvent affecter l'expression de l'ULK3 ; par conséquent, l'utilisation d'échantillons où la signalisation hedgehog ou l'autophagie est modulée pourrait aider à évaluer les performances de l'anticorps.

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