Anticorps polyclonal anti-ULK1/ULK2 pour WB, ELISA - O75385 / Q8IYT8

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de ULK1

• ULK1 est une sérine/thréonine kinase essentielle à l'initiation de l'autophagie, agissant en amont du complexe PI3K pour réguler la formation de l'autophagosome en réponse à la privation de nutriments. Références associées : PMID:18936157, PMID:21460634, PMID:21795849
• Elle participe à des boucles de rétroaction avec mTORC1 et AMPK, régulant et étant régulée par ces voies de détection de l'énergie pour affiner l'autophagie. Références associées : PMID:21795849, PMID:21460634
• ULK1 phosphoryle de multiples cibles en aval, notamment AMBRA1, ATG4B, FLCN, SESN2 et SQSTM1, afin de coordonner la nucléation, l'élongation et la reconnaissance des cargaisons de l'autophagosome. Références associées : PMID:20921139, PMID:28821708, PMID:25126726, PMID:25040165, PMID:37306101
• Au-delà de l'autophagie, ULK1 joue un rôle dans la différenciation neuronale précoce et est nécessaire à la formation des axones des cellules granulaires. Références associées : PMID:11146101
• ULK1 est principalement localisée dans le cytoplasme et le cytosol, et elle se déplace vers les structures pré-autophagosomales lors de l'induction de l'autophagie.
• Elle est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus adultes, avec des niveaux détectables dans le muscle squelettique, le cœur, le pancréas, le cerveau, le placenta, le foie, les reins et les poumons.
• L'anticorps cible une région N-terminale conservée (aa 1–283) et reconnaît à la fois ULK1 et son homologue ULK2 (Q8IYT8), permettant une détection complète des kinases de la famille ULK.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène comprend le domaine kinase N-terminal (aa 1–283), qui est critique pour l'activité catalytique. Cette conception peut permettre la détection de ULK1/ULK2 à la fois sous forme totale et phosphorylée, mais la spécificité de l'état de phosphorylation doit être validée expérimentalement.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des lysats cellulaires complets provenant de lignées cellulaires humaines dans des conditions stimulant l'autophagie (par exemple, privation d'acides aminés ou traitement à la rapamycine) pour observer les changements dans l'expression des protéines ou le décalage de mobilité.
• Les protocoles ELISA peuvent nécessiter une optimisation de la concentration de l'antigène de revêtement, des tampons de blocage et de la dilution de l'anticorps pour obtenir des rapports signal sur bruit optimaux.
• La réactivité croisée n'étant rapportée que pour l'humain, validez l'anticorps dans la matrice d'échantillon appropriée si vous utilisez des échantillons d'origine humaine dans votre système de test.

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