Anticorps Monoclonal Lapin Anti-Ubiquitine pour WB, IHC-P, ELISA - P0CG47

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la Polyubiquitine-B

• La Polyubiquitine-B, codée par le gène UBB, est un précurseur d'ubiquitine qui produit plusieurs unités d'ubiquitine après traitement.
• L'ubiquitine existe soit attachée de manière covalente aux protéines cibles (mono-ubiquitine ou chaînes de polyubiquitine), soit libre (non ancrée) ; les chaînes de polyubiquitine sont liées via différents résidus Lys (par ex. L'ys-6, L'ys-11, L'ys-29, L'ys-33, L'ys-48, L'ys-63) ou via la Met initiatrice, chacune ayant des fonctions cellulaires distinctes.
• Les chaînes de polyubiquitine liées par L'ys-48 ciblent les protéines pour la dégradation par le protéasome, tandis que les chaînes liées par L'ys-63 médient la signalisation non dégradative telle que l'endocytose, la réponse aux dommages de l'ADN et l'activation de NF-kappa-B.
• D'autres types de liaison incluent : L'ys-6 (réparation de l'ADN), L'ys-11 (ADRE et régulation du cycle cellulaire), L'ys-29 (réponse au stress protéotoxique et cycle cellulaire), L'ys-33 (modification des kinases) et chaînes linéaires (signalisation cellulaire).
• La polyubiquitine libre non ancrée fonctionne également dans l'activation des kinases et les voies de signalisation.
• L'ubiquitine est principalement localisée dans le cytoplasme et le noyau, et se trouve également sur la membrane externe des mitochondries.
• Les modifications post-traductionnelles de l'ubiquitine incluent la phosphorylation et l'ADP-ribosylationy.

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• Cet anticorps a été généré en utilisant une protéine de fusion recombinante couvrant l'ubiquitine humaine pleine longueur (aa 1-228), qui inclut tous les résidus clés pour la reconnaissance des formes monomériques et polyubiquitinées.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est de 26 kDa ; cependant, en raison de la conjugaison de l'ubiquitine à diverses cibles, une gamme de bandes à des poids moléculaires plus élevés peut être observée, reflétant les protéines polyubiquitinées.
• Lors de la réalisation d'une immunohistochimie (IHC-P), envisagez d'utiliser une méthode standard de récupération d'antigène et validez la spécificité de la coloration avec des tissus de contrôle positifs et négatifs appropriés.
• La réactivité de l'anticorps avec une large gamme d'espèces (prédite) suggère des épitopes conservés ; vérifiez la réactivité croisée dans le système expérimental spécifique si vous utilisez des espèces autres que l'humain, la souris ou le rat.
• Pour les applications ELISA, l'immunogène recombinant peut servir de contrôle positif pour établir la sensibilité et la spécificité du test.

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