Anticorps monoclonal anti-UBE4B pour WB, ELISA - O95155

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'UBE4B

• UBE4B (Ubiquitin Conjugation Factor E4 B) est une protéine multi-domaines fonctionnant à la fois comme une ligase d'ubiquitine E3 et E4 dans le système ubiquitine-protéasome.
• Elle catalyse le transfert de l'ubiquitine des enzymes E2 vers les substrats et peut assembler des chaînes polyubiquitine sur des cibles pré-ubiquitinylées, facilitant la dégradation par le protéasome.
• Dans le muscle strié, UBE4B coopère avec STUB1 et VCP/p97 pour ubiquinyler le chaperon de la myosine UNC45B, une étape cruciale pour la régulation de l'assemblage de la myosine. Références associées : PMID:17369820
• La protéine se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau, ce qui correspond à ses rôles dans divers processus cellulaires.
• UBE4B est principalement exprimé au niveau transcriptionnel dans l'ovaire, le testicule, le cœur et le muscle squelettique, et il est détecté au niveau protéique dans les myotubes différenciés. Son expression est faible dans le côlon, le thymus et les leucocytes du sang périphérique, et presque indétectable dans le poumon et la rate. Références associées : PMID:17369820 PMID:11802788
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation et l'acétylation ; l'épissage alternatif génère de multiples isoformes, modulant potentiellement son activité et ses interactions.
• Le domaine de type doigt de zinc RING est essentiel pour son activité de ligase E3, et la structure tridimensionnelle de la protéine a été étudiée pour comprendre les mécanismes de reconnaissance du substrat.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 1-100 dans l'extrémité N-terminale de l'UBE4B humain. Envisagez de vérifier la spécificité de l'anticorps par Western blot en utilisant des lysats de tissus à forte expression d'UBE4B, comme le cœur ou le muscle squelettique.
• Pour les applications WB, une bande d'environ 146 kDa est attendue. En raison de la grande taille de la protéine, assurez des conditions de transfert adéquates (par exemple, un temps de transfert suffisant) et utilisez des marqueurs de poids moléculaire appropriés.
• Cet anticorps présente une réactivité croisée avec l'UBE4B de souris et de rat ; les expériences pilotes sur ces espèces doivent inclure des contrôles appropriés pour confirmer la réactivité et la spécificité.
• Les protocoles ELISA peuvent nécessiter une optimisation du tampon de revêtement et de la concentration d'anticorps ; l'anticorps peut être utilisé soit pour la détection directe de l'antigène, soit comme composant d'une paire de capture/détection.

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