Anticorps polyclonal de lapin anti-Ube2N/Ubc13 pour WB et ELISA - P61088

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Ube2N/Ubc13

• Ube2N (également appelé Ubc13, UbcH13) est une enzyme de conjugaison de l'ubiquitine E2 qui forme un hétérodimère avec UBE2V1 ou UBE2V2 pour catalyser la synthèse de chaînes de polyubiquitine non canoniques liées par la Lys-63. Ce type de polyubiquitination ne cible pas les protéines pour la dégradation par le protéasome, mais joue plutôt des rôles régulateurs dans la signalisation, la réparation de l'ADN et le contrôle du cycle cellulaire.
• L'enzyme joue un rôle critique dans la voie de tolérance aux dommages à l'ADN sans erreur en médiant la polyubiquitination de PCNA liée par la Lys-63 en association avec les E3 ligases HLTF et SHPRH, processus essentiel à la réparation de l'ADN et à la survie cellulaire après un stress génotoxique.
• Ube2N est impliqué dans la signalisation immunitaire innée : avec RNF135 et UBE2V1, il catalyse la polyubiquitination dépendante de l'ARN viral de RIG-I liée par la Lys-63 pour activer la production d'interféron bêta (PubMed:28469175). De plus, l'hétérodimère UBE2V1-UBE2N promeut l'activité de restriction spécifique de la capside par TRIM5 en générant des chaînes de polyubiquitine qui activent le complexe kinase TAK1, conduisant à l'expression de gènes inflammatoires dépendants de NF-kB et MAPK (PubMed:31006531). Références associées : PMID:28469175 PMID:31006531
• Au niveau subcellulaire, Ube2N se localise à la fois dans le noyau et le cytoplasme, ce qui est cohérent avec ses fonctions diverses dans la réparation de l'ADN (nucléaire) et les voies de signalisation cytoplasmiques.
• La protéine est soumise à des modifications post-traductionnelles incluant l'acétylation et la formation de ponts disulfures, et elle fonctionne par formation de liaison isopeptidique lors du transfert de l'ubiquitine. Elle appartient à la famille des enzymes de conjugaison de l'ubiquitine E2 et est classée dans la voie de conjugaison Ubl.
• Ube2N participe à l'activation transcriptionnelle des gènes cibles et joue un rôle dans la progression et la différenciation du cycle cellulaire. Il intervient également dans la voie de signalisation de l'IL-17A en médiant la polyubiquitination de TRAF6 liée par la Lys-63 avec TRAF3IP2.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps polyclonal de lapin comprend la totalité de la protéine Ube2N humaine (acides aminés 1–152). Cette conception peut permettre la reconnaissance de multiples épitopes, offrant potentiellement une détection robuste même si certains épitopes sont masqués ou dénaturés. Cependant, la réactivité croisée avec d'autres enzymes E2 partageant des régions conservées doit être prise en compte ; une validation dans le système d'échantillon concerné est recommandée.
• L'anticorps est validé pour le Western blotting (WB) et l'ELISA par le fournisseur. Pour WB, une bande proche de 17 kDa est attendue. Il est conseillé de confirmer la spécificité en utilisant des lysats de contrôle positifs et négatifs, notamment de cellules humaines, de souris ou de rat, compte tenu de la réactivité croisée rapportée.
• Compte tenu des rôles d'Ube2N dans de nombreuses voies, les chercheurs peuvent explorer son expression ou sa modification dynamique dans des conditions de dommages à l'ADN, de stimulation immunitaire innée ou d'arrêt du cycle cellulaire. Les niveaux de détection endogène peuvent varier ; l'optimisation de la dilution de l'anticorps et des temps d'exposition peut être nécessaire.
• Pour les applications ELISA, le couplage avec un anticorps de capture ou un antigène adapté peut aider à établir des essais quantitatifs. Envisagez d'évaluer la linéarité et la sensibilité en utilisant la protéine Ube2N recombinante comme étalon.

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