Anticorps monoclonal de lapin anti-Ube2N/Ubc13 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P61088

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Ube2N/Ubc13

• Ube2N (également connu sous le nom d'Ubc13) est une enzyme ubiquitine-conjugante E2 qui forme des hétérodimères fonctionnels avec les sous-unités non catalytiques UBE2V1 ou UBE2V2.
• Les complexes UBE2V1–UBE2N et UBE2V2–UBE2N catalysent spécifiquement l'assemblage de chaînes de polyubiquitine non canoniques liées par Lys‑63, qui ne ciblent pas les substrats pour la dégradation protéasomique.
• Il joue un rôle essentiel dans la tolérance aux dommages de l'ADN sans erreur en médiant la polyubiquitination liée à la Lys‑63 de PCNA, en coopération avec les ligases E3 HLTF et SHPRH.
• Dans l'immunité innée antivirale, l'hétérodimère UBE2N‑UBE2V1, avec la ligase E3 RNF135, catalyse la polyubiquitination dépendante de l'ARN viral liée à la Lys‑63 de RIG‑I, une étape critique pour la production en aval d'interféron‑bêta. Références associées : PMID:28469175, PMID:31006531
• L'enzyme fonctionne également dans la signalisation inflammatoire NF‑κB et MAPK ; par exemple, le dimère UBE2V1‑UBE2N agit de concert avec TRIM5 pour générer des chaînes liées à la Lys‑63 qui activent le complexe kinase TAK1, tandis qu'avec TRAF3IP2, il médie la polyubiquitination de TRAF6 en aval de l'IL‑17A.
• Ube2N se localise à la fois dans le noyau et le cytoplasme, ce qui correspond à ses doubles rôles dans la réparation de l'ADN nucléaire et la transduction du signal cytoplasmique.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation et la formation de ponts disulfure ; la protéine mature a un poids moléculaire calculé d'environ 17 kDa.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'anticorps a été produit contre un peptide situé dans les 100 premiers acides aminés de l'Ube2N humain ; la séquence de l'immunogène est hautement conservée chez la souris et le rat, ce qui soutient la réactivité croisée rapportée.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 17 kDa est attendue ; les lysats cellulaires totaux de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat sont des échantillons appropriés.
• En immunohistochimie (IHC‑P), une récupération antigénique peut être nécessaire ; validez la coloration dans des tissus connus pour exprimer Ube2N et utilisez des contrôles appropriés.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), confirmez la localisation nucléaire et cytoplasmique ; il est recommandé d'optimiser les conditions de fixation et de perméabilisation.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être couplé à un système de détection approprié ; envisagez d'utiliser la protéine recombinante Ube2N ou le peptide immunisant comme contrôle positif.

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