Anticorps polyclonal de lapin anti-UBE2D3 pour WB et ELISA - P61077

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'UBE2D3

• Identité de la protéine et poids moléculaire : UBE2D3 (UBCH5C, UBC4/5, E2(17)KB3) est un membre de la famille des enzymes E2 conjuguées à l'ubiquitine, codé par le gène UBE2D3. Son poids moléculaire prédit est d'environ 16,7 kDa.
• Fonction catalytique principale : Accepte l'ubiquitine de l'enzyme E1 et catalyse son attachement covalent aux protéines substrats, médiant à la fois la polyubiquitination liée par « Lys-11 » et « Lys-48 » in vitro. Références associées : PMID:15247280 PMID:15496420 PMID:18284575
• Voie NF-kappa-B : Coopère avec l'enzyme E2 CDC34 et le complexe ligase E3 SCF(FBXW11) pour polyubiquitiner NFKBIA, conduisant à sa dégradation par le protéasome. UBE2D3 amorce NFKBIA avec une mono-ubiquitine sur « Lys-21 »/« Lys-22 », suivie d'un élongation de la chaîne par CDC34. Références associées : PMID:20347421 PMID:10329681
• Tolérance aux dommages de l'ADN : Agit comme une enzyme E2 d'initiation avec RNF8 pour l'amorçage de PCNA avec une mono-ubiquitine, une étape clé de la voie de tolérance aux dommages de l'ADN activée pendant la phase S. Références associées : PMID:18948756
• Réparation de l'ADN : S'associe au complexe ligase E3 BRCA1/BARD1 pour ubiquitiner les substrats sur les sites de dommages à l'ADN induits par les rayonnements ionisants. Références associées : PMID:16628214
• Régulation des récepteurs tyrosine kinase et localisation subcellulaire : Conjointement avec la ligase E3 CBL, cible l'EGFR pour la polyubiquitination à la membrane plasmique et lors du transport endosomal. UBE2D3 se localise à la membrane cellulaire et à la membrane endosomale. Références associées : PMID:18508924
• Contrôle de la qualité des protéines et autres substrats : Avec STUB1, ubiquitine les protéines non repliées pour leur destruction par le protéasome. Médie également l'ubiquitination de p53/TP53 avec MDM2 et TOPORS, et de DAPK3 influençant les corps nucléaires PML. Références associées : PMID:11743028 PMID:12646252 PMID:15280377 PMID:18515077
• Signalisation immunitaire et surveillance de la traduction : Avec RNF135, catalyse la polyubiquitination liée par « Lys-63 » dépendante de l'ARN viral de RIGI pour la production d'interféron bêta. De plus, avec ZNF598, ubiquitine les protéines ribosomiques 40S suite à des collisions de ribosomes, et coopère avec GATOR2 pour ubiquitiner NPRL2. Références associées : PMID:28469175 PMID:28685749 PMID:36528027

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 1-100 de l'UBE2D3 humain (NP_003331.1). Cette région N-terminale peut fournir une spécificité ; envisagez un alignement de séquence avec les orthologues de souris et de rat lors de la planification d'expériences inter-espèces.
• Pour le Western blot, l'UBE2D3 a un poids moléculaire prédit d'environ 17 kDa. Utilisez un pourcentage de gel approprié (par exemple, 12-15 % SDS-PAGE) et vérifiez la bande avec un lysat de contrôle positif connu provenant de cellules humaines, de souris ou de rat.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la détection indirecte de l'antigène peptidique ou de l'UBE2D3 endogène ; validez les conditions de l'essai avec une protéine recombinante ou des lysats cellulaires.
• Notez que des produits d'épissage alternatifs existent ; confirmez que l'anticorps reconnaît l'isoforme prévu dans votre système expérimental.
• Comme l'UBE2D3 est impliqué dans de nombreux processus cellulaires, envisagez d'induire des conditions de stress pertinentes (par exemple, dommages à l'ADN, stress protéotoxique) pour moduler son expression ou son activité dans le cadre d'études fonctionnelles.

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