Anticorps polyclonal de lapin anti-UBA5 pour WB, IHC-P, ELISA - Q9GZZ9

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'UBA5

• UBA5 est l'enzyme de type E1 qui catalyse l'étape initiale de l'activation d'UFM1 dans la voie de l'ufmylation, un système de modification de type ubiquitine. Références associées : PMID:15071506, PMID:18442052, PMID:20368332

• L'enzyme active UFM1 en adénylant sa glycine C-terminale avec de l'ATP, suivie de la formation d'une liaison thioester entre UFM1 et la cystéine catalytique de l'UBA5, libérant de l'AMP. Références associées : PMID:20368332, PMID:26929408, PMID:27653677

• L'activation d'UFM1 se produit via un mécanisme de trans-liaison où UFM1 interagit avec les deux sous-unités de l'homodimère UBA5, améliorant la liaison de l'ATP et la stabilité de l'homodimère. Références associées : PMID:27653677, PMID:29295865

• UBA5 transfère ensuite l'UFM1 activé à l'enzyme de type E2 UFC1 via un autre mécanisme trans. Références associées : PMID:27653677, PMID:34588452

• L'ufmylation, médiée par UBA5, est impliquée dans divers processus cellulaires, notamment le recyclage des ribosomes, la réponse aux dommages de l'ADN, la signalisation de l'interféron et la réticulophagie (ER-phagy). Références associées : PMID:30412706, PMID:32160526, PMID:35394863

• L'ufmylation est essentielle pour la différenciation érythroïde des mégacaryocytes et des érythrocytes.

• UBA5 se localise dans le cytoplasme, le noyau, la membrane du réticulum endoplasmique et l'appareil de Golgi.

• Il est largement exprimé dans les tissus et contient un domaine de liaison au zinc ; une phosphorylation a été identifiée.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre l'UBA5 humaine pleine longueur (aa 1-404), donc l'anticorps peut reconnaître à la fois la protéine native et dénaturée. Pour le Western blot, des conditions dénaturantes et réductrices standard sont recommandées.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), les méthodes de récupération d'antigène doivent être optimisées en fonction du type de tissu ; des tissus de contrôle positifs avec une expression connue de l'UBA5 (par exemple, foie, rein) peuvent être utilisés.
• Les performances ELISA peuvent varier en fonction des conditions de revêtement ; effectuez une titration en damier pour déterminer les concentrations optimales d'anticorps et d'antigène.
• En raison de la forte identité de séquence entre les UBA5 humaine, de souris et de rat, une réactivité croisée est attendue, mais confirmez la spécificité dans votre modèle expérimental.
• Pour les tests quantitatifs, envisagez d'utiliser une courbe standard de protéine UBA5 recombinante.

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