Anticorps polyclonal de lapin anti-U1A/SNRPA pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09012

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de U1A/SNRPA

• U1A (petite ribonucléoprotéine nucléaire A U1) est un composant du snRNP U1, qui joue un rôle essentiel dans la reconnaissance du site d'épissage 5' du pré-ARNm et les étapes initiales de l'assemblage du spliceosome. Le snRNP U1 est le premier à se lier au pré-ARNm, facilitant la liaison ultérieure de U2 et du tri-snRNP U4/U6/U5.
• SNRPA se lie spécifiquement à la boucle de tige II de l'ARNsn U1, contribuant à la stabilisation du complexe snRNP U1 – pré-ARNm et à la définition précise du site d'épissage 5'.
• Sous forme sans snRNP (SF-A), U1A peut participer au couplage de l'épissage du pré-ARNm et de la polyadénylation, et il présente une préférence de liaison pour le motif 5'-UGCAC-3' sur les ARN.
• La protéine est localisée exclusivement dans le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle dans le traitement du pré-ARNm.
• U1A subit plusieurs modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la phosphorylation et la méthylation, qui peuvent réguler son activité et ses interactions.
• Le poids moléculaire de l'isoforme canonique est d'environ 31,3 kDa, et il appartient à la famille des ribonucléoprotéines avec des motifs de reconnaissance d'ARN (RRM) caractéristiques.
• Les processus biologiques clés associés à U1A/SNRPA incluent l'épissage de l'ARNm, le traitement de l'ARNm et l'assemblage du spliceosome, et c'est un composant du complexe snRNP U1.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, une bande d'environ 31 kDa correspondant à U1A/SNRPA est attendue. Validez la détection en utilisant des extraits nucléaires ou des lysats cellulaires totaux pertinents d'échantillons humains, de souris ou de rat.
• En immunohistochimie (IHC-P), des méthodes de récupération d'antigène peuvent être nécessaires ; optimisez les protocoles à base de citrate ou d'EDTA, et incluez des contrôles appropriés pour la coloration nucléaire.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), assurez une perméabilisation nucléaire efficace (par exemple, traitement au Triton X-100) et envisagez une co-coloration avec un marqueur de spliceosome ou du DAPI pour confirmer la localisation nucléaire.
• Cet anticorps est adapté pour l'ELISA ; il peut être utilisé pour détecter l'U1A/SNRPA recombinant ou natif. Il est recommandé d'optimiser la concentration d'antigène de revêtement et la dilution de l'anticorps.
• L'immunogène couvre la protéine entière (acides aminés 1–282), ce qui rend l'anticorps susceptible de reconnaître à la fois les formes natives et dénaturées, mais la réactivité croisée avec d'autres composants du snRNP U1 doit être exclue par des contrôles appropriés.

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