Anticorps polyclonal Anti-TTK pour WB, IF/ICC, ELISA - P33981

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du TTK

• La protéine kinase à double spécificité TTK (également connue sous le nom de MPS1) est une sérine/thréonine et tyrosine kinase qui joue un rôle critique dans le point de contrôle de l'assemblage du fuseau mitotique, retardant l'anaphase jusqu'à ce que tous les chromosomes soient correctement bi-orientés, et dans la correction des attaches erronées kinétochore-microtubules.
  Références connexes : PMID:18243099, PMID:28441529, PMID:29162720
• Le TTK phosphoryle MAD1L1 pour favoriser le point de contrôle de l'assemblage du fuseau mitotique.
  Références connexes : PMID:18243099, PMID:29162720
• Il phosphoryle CDCA8/Boréalin, améliorant l'activité de la kinase Aurora B (AURKB) au niveau du kinétochore.
  Références connexes : PMID:18243099
• La phosphorylation de SKA3 sur la Ser-34 par le TTK déclenche la dissociation du complexe SKA des microtubules, déstabilisant les attaches kinétochore-microtubules.
  Références connexes : PMID:28441529
• Le TTK phosphoryle KNL1, KNTC1 et s'autophosphoryle également, contribuant à la signalisation du point de contrôle.
  Références connexes : PMID:28441529
• Il phosphoryle MCRS1, améliorant le recrutement de KIF2A aux extrémités moins des microtubules du fuseau, ce qui favorise l'alignement des chromosomes.
  Références connexes : PMID:30785839
• La protéine est présente dans les lignées cellulaires à prolifération rapide, ce qui est cohérent avec ses fonctions mitotiques.
• Le TTK contient un domaine kinase de liaison à l'ATP, subit une acétylation et un épissage alternatif, et est répertorié comme une phosphoprotéine du protéome de référence.

Conseils expérimentaux et techniques

• Pour le Western blot, l'immunogène cible la région C-terminale (aa 536-789) du TTK humain. Le poids moléculaire prédit est d'environ 97 kDa ; confirmez la migration de la bande dans vos lysats et conditions spécifiques.
• En immunofluorescence/ICC, le TTK se localise aux kinétochores lors de la mitose. Utilisez des protocoles de perméabilisation et de fixation appropriés pour une coloration optimale des kinétochores. Validez dans des populations de cellules mitotiques (par exemple, cellules traitées au nocodazole).
• Pour les applications ELISA, titrez l'anticorps à la fois comme réactif de capture et de détection pour déterminer les concentrations de travail appropriées. Incluez des témoins positifs et négatifs.
• L'anticorps réagit de manière croisée avec le TTK humain, souris et rat, mais l'homologie de séquence dans la région de l'immunogène suggère une réactivité possible avec d'autres espèces ; la validation dans l'espèce cible est recommandée.
• Envisagez d'utiliser un témoin de chargement approprié et des anticorps spécifiques aux phosphoprotéines pour les études fonctionnelles de l'activité kinase du TTK.

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