Anticorps polyclonal anti-TRIM25 pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q14258

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de TRIM25

• Code une ligase E3 de l'ubiquitine/de l'ISG15 qui joue un rôle essentiel dans l'immunité innée en assurant la polyubiquitination liée à la « Lys-63 » de RIG-I (DDX58) et d'IFIH1 (MDA5), ce qui entraîne la production d'interféron de type I lors d'une infection virale. Références associées : PMID:17392790, PMID:29357390, PMID:30193849

• Agit comme une protéine sensible aux œstrogènes, en médiant l'action des œstrogènes par l'ubiquitination et la dégradation protéasomale de ZFHX3, reliant ainsi la signalisation hormonale au renouvellement des protéines. Références associées : PMID:22452784

• Agit comme une ligase E3 de l'ISG15, favorisant l'ISGylation de la 14-3-3 sigma (SFN) et participant à des voies plus larges d'ISGylation. Références associées : PMID:16352599, PMID:17069755

• Médie la polyubiquitination liée à la « Lys-63 » de la protéine antivirale ZAP/ZC3HAV1, nécessaire à une liaison optimale à l'ARNm viral cible. Références associées : PMID:28060952, PMID:28202764

• Favorise la reprise des fourches de réplication bloquées en interagissant avec l'échafaudage KHDC3L-OOEP et en ubiquitinant l'hélicase BLM, ce qui facilite le recrutement de BLM sur les sites de dommages à l'ADN.

• Participe à la suppression de l'autophagie en ubiquitinant et en dégradant le récepteur de l'autophagie p62/SQSTM1. Références associées : PMID:40542578

• Ubiquitine des substrats impliqués dans la formation des granules de stress, la dégradation des ARNm médiée par les codons non-sens, la synthèse des nucléosides et la traduction/stabilité des ARNm, comme l'ont révélé des études protéomiques. Références associées : PMID:36067236

• Se localise au niveau subcellulaire dans le cytoplasme, les granules de stress et le noyau, ce qui reflète la diversité de ses rôles fonctionnels. Appartient à la famille des protéines TRIM, caractérisées par un doigt de zinc RING, un ou plusieurs doigts de zinc B-box et un domaine en superhélice.

• Est exprimée de manière ubiquitaire, avec une expression notable au niveau protéique dans les tumeurs du sein.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, prévoir une bande autour de 71 kDa ; utiliser des contrôles positifs appropriés, tels que des lysats de cellules HeLa, et valider à l'aide d'un peptide bloquant ou d'un contrôle par extinction de l'expression.
• En IHC-P, envisager d'optimiser les conditions de récupération antigénique (par exemple, tampon citrate, pH 6,0) et valider avec des tissus connus pour être positifs à TRIM25, tels qu'un carcinome mammaire.
• Pour l'IF/ICC, tester les protocoles de fixation et de perméabilisation (par exemple, méthanol contre PFA/Triton), car les différentes localisations (cytoplasme, granules de stress, noyau) peuvent nécessiter des conditions adaptées.
• Cet anticorps polyclonal présente une réactivité croisée avec les protéines de souris et de rat ; vérifier la réactivité spécifique à l'espèce dans votre système expérimental en comparant l'homologie de séquence de la région immunogène.
• Pour l'IP, ajuster soigneusement la quantité d'anticorps afin de minimiser les liaisons non spécifiques ; inclure un contrôle d'isotype et une étape de pré-clarification.
• Les applications ELISA peuvent bénéficier d'un revêtement réalisé avec le fragment immunogène ; confirmer la linéarité et la spécificité à l'aide de la protéine TRIM25 recombinante.

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