Anticorps polyclonal de lapin anti-TPSAB1 pour WB et ELISA - Q15661

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la TPSAB1

• TPSAB1 code pour la tryptase alpha/bêta-1, également connue sous le nom de tryptase I ou tryptase alpha-1, qui est la principale protéase neutre stockée dans les granules sécrétoires des mastocytes.
• La tryptase est sécrétée lors de l'activation et de la dégranulation des mastocytes, et pourrait jouer un rôle dans l'immunité innée. L'isoforme 2 clive les gros substrats comme la fibronectine plus efficacement que l'isoforme 1, mais est moins efficace sur les petits substrats.

Références associées : PMID:18854315

• Le gène subit un épissage alternatif, produisant deux isoformes (isoforme 1 et isoforme 2) avec des spécificités de substrat et des profils d'expression distincts.
• Au niveau subcellulaire, la tryptase est sécrétée, ce qui est cohérent avec son rôle de protéase extracellulaire libérée par les mastocytes.
• L'isoforme 1 est principalement exprimée dans le poumon, l'estomac, la rate, le cœur et la peau, tandis que l'isoforme 2 se trouve dans l'aorte, la rate et les tumeurs mammaires, en particulier dans les cellules endothéliales plutôt que dans les mastocytes.
• Les caractéristiques structurelles clés comprennent des ponts disulfures, une glycosylation et un peptide signal N-terminal, la protéine étant synthétisée sous forme de zymogène nécessitant une activation protéolytique.
• Le poids moléculaire calculé est d'environ 30,5 kDa (UniProt), souvent observé à ~31 kDa sur des gels dénaturants en raison des modifications post-traductionnelles.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 31–275 de la TPSAB1 humaine. Validez la spécificité de l'anticorps en effectuant un test de blocage peptidique ou en comparant les signaux dans des échantillons surexprimant la TPSAB1 par rapport à des échantillons où elle est inactivée (knockdown).
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 31 kDa ; cependant, en tant qu'anticorps polyclonal, des bandes supplémentaires peuvent être observées. Utilisez des contrôles de charge appropriés et envisagez un blocage de la membrane avec du lait écrémé à 5 %.
• Pour l'ELISA, optimisez les conditions de revêtement et les concentrations d'anticorps en utilisant de la TPSAB1 recombinante ou la protéine native dans des échantillons biologiques.
• Cet anticorps présente une réactivité croisée avec la souris et le rat, ce qui le rend adapté aux études translationnelles, mais vérifiez la réactivité dans votre modèle expérimental spécifique.
• Conservez l'anticorps à -20°C et évitez les cycles répétés de congélation-décongélation pour maintenir son activité.

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