Anticorps polyclonal anti-Topo IIα pour WB, IHC-P, ELISA - P11388

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la Topo IIα

• La topoisomérase 2-alpha de l'ADN (Topo IIα), codée par le gène TOP2A, est une enzyme critique dépendante de l'ATP qui module la topologie de l'ADN en clivant et en religaturant transitoirement l'ADN double brin, permettant le passage d'une double hélice à travers une autre (PubMed:17567603, PubMed:18790802, PubMed:22013166). Références associées : PMID:17567603 PMID:18790802 PMID:22013166
• La Topo IIα est principalement localisée dans le noyau, avec une concentration élevée dans le nucléoplasme et le nucléole ; elle est également détectée dans le cytoplasme, notamment pendant la division cellulaire.
• Elle est largement exprimée dans les tissus prolifératifs tels que les amygdales, la rate, les ganglions lymphatiques, le thymus et les testicules, et est particulièrement surexprimée dans les lymphomes de haut grade, les tumeurs pulmonaires épidermoïdes et les séminomes (PubMed:9155056). Références associées : PMID:9155056
• Les modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination, régulent l'activité, la stabilité et la localisation cellulaire de la Topo IIα.
• La protéine présente un épissage alternatif, produisant plusieurs isoformes dont les poids moléculaires se situent entre 174 et 182 kDa.
• La Topo IIα pourrait également participer à la régulation du rythme circadien en influençant la durée de la période d'oscillation transcriptionnelle de BMAL1 (par analogie).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique issu de la région C-terminale (aa 1431-1531), ce qui peut conférer une grande spécificité pour la Topo IIα.
• Pour le Western blot, en raison de la grande taille de la protéine (environ 174-182 kDa), il convient d'optimiser les conditions de transfert des protéines (par exemple, réduire le pourcentage de méthanol et prolonger la durée du transfert) et de vérifier les bandes à l'aide de standards de poids moléculaire appropriés.
• En immunohistochimie (IHC-P), il convient d'envisager des protocoles de récupération antigénique (par exemple, la récupération des épitopes induite par la chaleur) et de titrer l'anticorps afin de minimiser le bruit de fond.
• Pour les applications ELISA, cet anticorps polyclonal peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; son association avec un anticorps monoclonal peut améliorer la spécificité dans les essais en sandwich.
• La réactivité croisée a été validée pour les échantillons humains ; pour les autres espèces, il convient de vérifier l'homologie de séquence de l'immunogène avant utilisation.

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