Anticorps Anti-TOP2A (DNA Topoisomérase II Alpha) Polyclonal de Lapin pour WB et ELISA - P11388

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la Topoisomérase II Alpha de l'ADN

• La topoisomérase 2-alpha de l'ADN (TOP2A) est une enzyme nucléaire essentielle pour résoudre les problèmes topologiques de l'ADN tels que la surenroulement, la caténation et la décaténation, critiques lors de la réplication, de la transcription de l'ADN et de la ségrégation des chromosomes. Références connexes : PMID:17567603, PMID:18790802, PMID:22013166
• La TOP2A forme un homodimère et catalyse le passage dépendant de l'ATP d'un segment d'ADN double brin à travers une rupture double brin transitoire dans un autre, modifiant la topologie de l'ADN via un mécanisme de clivage et religaison.
• Appartient à la famille des topoisomérases de type II de l'ADN et est hautement conservée chez les eucaryotes ; elle partage une homologie avec TOP2B, l'isoforme bêta, mais présente des modèles d'expression et des rôles fonctionnels distincts.
• Se localise principalement dans le noyau, y compris le nucléoplasme et le nucléole, et est également détectée dans le cytoplasme lors de certaines phases du cycle cellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, qui modulent la stabilité des protéines, l'activité enzymatique et la liaison aux chromosomes.
• Exprimée dans divers tissus normaux tels que les amygdales, la rate, les ganglions lymphatiques, le thymus et les testicules, et fortement exprimée dans les cellules en prolifération ; son expression est régulée à la hausse dans de nombreux cancers, y compris les lymphomes de haut grade et les tumeurs pulmonaires squameuses. Références connexes : PMID:9155056
• Joue un rôle putatif dans la régulation du rythme circadien en influençant l'oscillation transcriptionnelle de BMAL1.
• Souvent utilisé comme marqueur de prolifération et cible thérapeutique en oncologie ; des inhibiteurs comme l'étoposide ciblent spécifiquement la TOP2A pour induire des dommages à l'ADN dans les cellules à division rapide.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène correspond à un peptide près de l'extrémité C-terminale du TOP2A humain ; l'anticorps peut reconnaître à la fois les isoformes de longueur complète et tronquées si elles sont présentes.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 174 kDa est attendue dans les lysats de cellules ou de tissus humains ; utilisez un gel pour poids moléculaires élevé et des conditions de transfert appropriées.
• Envisagez d'enrichir les fractions nucléaires pour améliorer la détection, car la TOP2A est principalement nucléaire.
• Pour l'ELISA, le peptide synthétique peut être immobilisé comme témoin positif ; l'anticorps peut capturer la TOP2A native dans les puits de puits échantillons enrobés.
• Puisqu'il s'agit d'un anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être vérifiée pour les applications quantitatives.
• Validez la spécificité de l'anticorps par knockdown par ARNsi ou comparaison avec des lignées cellulaires négatives pour TOP2A.

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