Anticorps polyclonal de lapin Anti-TOP1MT pour WB, IHC-P, ELISA - Q969P6

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de TOP1MT

• TOP1MT code pour la topoisomérase I mitochondriale ADN, une enzyme clé responsable de la résolution des surenroulements et des tensions torsionnelles lors de la réplication et de la transcription de l'ADN mitochondrial (UniProtKB : Q969P6).
• L'enzyme agit en clivant transitoirement un brin d'ADN par une réaction de transestérification, formant un intermédiaire covalent ADN-(3'-phosphotyrosyl)-enzyme, ce qui permet au brin libre de tourner et de résoudre les surenroulements avant la religation (par similarité).
• TOP1MT est localisée exclusivement dans la mitochondrie, où elle joue un rôle essentiel dans le maintien de la topologie de l'ADN mitochondrial.
• L'expression est ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés observés dans le muscle squelettique, le cœur, le cerveau et le foie fœtal.
• En tant que topoisomérase de type IB, TOP1MT contient un domaine de liaison à l'ADN et un résidu tyrosine catalytique indispensable à son activité ; les mots-clés incluent isomérase, liaison à l'ADN et topoisomérase.
• L'épissage alternatif du gène TOP1MT produit plusieurs variants de transcrits, contribuant potentiellement à la diversité fonctionnelle.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région C-terminale (acides aminés 470-550) de TOP1MT humaine, ce qui suggère que l'anticorps peut détecter les isoformes complètes et celles contenant l'extrémité C-terminale ; vérifiez la réactivité croisée avec les isoformes de rat par alignement de séquence.
• Pour le Western blotting, une bande attendue proche de 70 kDa est typique ; optimisez le transfert pour les protéines de haut poids moléculaire et utilisez des échantillons enrichis en mitochondries pour obtenir un meilleur signal.
• En analyse immunohistochimique (IHC-P), attendez-vous à des motifs de coloration mitochondriale ; incluez des contrôles appropriés et optimisez la récupération d'antigène pour les antigènes mitochondriaux.
• Validez la spécificité de l'anticorps à l'aide de modèles knockout ou knockdown pour minimiser la réactivité croisée potentielle avec les topoisomérases nucléaires comme TOP1.
• Pour ELISA, l'anticorps peut lier TOP1MT recombinante ou purifiée ; envisagez de l'associer à un anticorps de détection adapté pour le développement d'ELISA sandwich.

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