Anticorps monoclonal anti-TOM20 (conjugué ) pour WB et IF - Q15388

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de TOM20

• La sous-unité réceptrice TOM20 homologue du complexe d’importation mitochondriale, également désignée MAS20, MOM19 ou TOM20, est codée par le gène TOMM20.
• Composant récepteur central du complexe translocase de la membrane externe (TOM) ; avec TOMM22, elle reconnaît et lie les préprotéines mitochondriales cytosoliques via leurs séquences de ciblage N-terminales, les dirigeant vers le pore de translocation TOM40. Références associées : PMID:40080546 PMID:18331822
• Dans les mitochondries dépolarisées, le complexe TOM s’associe à VDAC2 et à la kinase PINK1 ; cette interaction stabilise PINK1 sur la membrane externe et déclenche la mitophagie par le recrutement de la ligase E3 de l’ubiquitine PRKN (Parkin). Références associées : PMID:40080546
• Nécessaire à la translocation à travers la membrane mitochondriale externe des monooxygénases du cytochrome P450 (par homologie).
• Localisation subcellulaire : fermement ancrée dans la membrane mitochondriale externe par l’intermédiaire d’une unique hélice transmembranaire C-terminale (résidus 126 à 145), le domaine N-terminal étant exposé au cytosol.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation de plusieurs résidus et des liaisons isopeptidiques (conjugaison Ubl) ; celles-ci peuvent réguler l’activité du récepteur et le renouvellement de la protéine.
• Acteur clé de la biogenèse mitochondriale, du contrôle qualité et de la survie cellulaire, ce qui en fait une cible précieuse dans les études sur la neurodégénérescence, les troubles métaboliques et le cancer.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Cet anticorps est pré-étiqueté avec , un fluorophore rouge lointain, permettant une détection directe sans anticorps secondaires en immunofluorescence (IF/ICC, IF-P) et en western blot (WB) avec des systèmes d’imagerie dans le proche infrarouge.
• L’immunogène comprend les acides aminés 20 à 145 de TOM20 humain, couvrant le domaine récepteur cytosolique ; l’enrichissement des fractions mitochondriales ou l’utilisation de marqueurs spécifiques des organites peut améliorer la spécificité du signal.
• Présente une réactivité croisée avec TOM20 humain, de souris et de rat ; valider dans la lignée cellulaire appropriée (p. ex. HeLa, HepG2, NIH/3T3) ou dans le tissu concerné.
• En WB, s’attendre à une bande migrant à environ 16 kDa ; en IF, un co-marquage avec un marqueur mitochondrial (p. ex. anti-COX IV, MitoTracker) confirme la localisation dans la membrane externe.
• Il est recommandé d’optimiser la dilution de l’anticorps ; les concentrations initiales typiques des anticorps conjugués sont comprises entre 1:50 et 1:200 pour l’IF et entre 1:500 et 1:2000 pour le WB, mais doivent être ajustées par titration dans le système expérimental.

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