Anticorps polyclonal anti-TOLLIP pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9H0E2

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de TOLLIP

• TOLLIP est un composant essentiel des voies de signalisation de l’IL-1 et des récepteurs Toll-like, agissant comme un régulateur négatif en inhibant l’activation cellulaire lors d’une stimulation microbienne. Il recrute IRAK1 au complexe du récepteur de l’IL-1 et bloque la phosphorylation ainsi que l’activité kinase d’IRAK1. Références associées : PMID:10854325 PMID:11751856

• En agissant comme adaptateur de la famille ubiquitine-ATG8, TOLLIP relie la voie de l’ubiquitine à l’autophagie, en assurant l’élimination autophagique sélective des conjugués d’ubiquitine et des agrégats cytotoxiques de protéines polyQ. Références associées : PMID:25042851

• En association avec TOM1, TOLLIP facilite le recrutement des protéines conjuguées à l’ubiquitine vers les endosomes précoces, jouant ainsi un rôle dans le trafic endosomal. Références associées : PMID:15047686

• TOLLIP se lie spécifiquement au phosphatidylinositol 3-phosphate (PtdIns(3)P), un lipide enrichi dans les endosomes précoces et les autophagosomes, ce qui renforce son rôle dans les fonctions endosomales et autophagiques. Références associées : PMID:26320582

• La protéine est principalement localisée dans le cytoplasme et les endosomes précoces, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la signalisation et le trafic membranaire.

• Les modifications post-traductionnelles comprennent l’acétylation et la phosphorylation, et le gène subit un épissage alternatif. Ces modifications peuvent réguler ses diverses fonctions dans l’immunité et l’autophagie.

• Le poids moléculaire est d’environ 30 kDa (30,28 kDa calculés), et la protéine appartient à une famille de protéines impliquées dans l’inflammation et l’immunité innée.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est une protéine recombinante couvrant les acides aminés 1 à 274 de la TOLLIP humaine, qui contient le domaine CUE et le domaine de liaison à TOM1. Cette conception peut conférer une réactivité à plusieurs isoformes et entre différentes espèces (humaine, souris, rat).
• Pour le Western blot, il est recommandé d’utiliser des lysats de cellules entières ou de tissus exprimant TOLLIP, tels que des cellules immunitaires ou des tissus présentant une autophagie active. La taille de bande prédite est d’environ 30 kDa.
• Pour l’immunohistochimie (paraffine) et l’immunofluorescence/immunocyt chimie, les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées. Une coloration positive est attendue selon des motifs cytoplasmiques et endosomaux ponctués.
• Pour les applications ELISA, cet anticorps polyclonal peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection après un titrage approprié.
• Incluez toujours des contrôles appropriés (par exemple, des échantillons knockout ou soumis à une extinction par siRNA) afin de confirmer la spécificité, en particulier pour les homologues proches.
• Comme il s’agit d’un anticorps polyclonal, une variabilité entre les lots peut exister ; une validation dans le système expérimental spécifique est recommandée.

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