Anticorps polyclonal de lapin Anti-TNFSF13B pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9Y275

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de TNFSF13B

• TNFSF13B (également appelé BAFF, BLyS ou TALL-1) est une cytokine appartenant à la superfamille des ligands du facteur de nécrose tumorale (TNF), avec deux isoformes majeurs générés par épissage alternatif ; l'isoforme 1 est la forme bioactive complète, tandis que l'isoforme 2 peut inhiber la sécrétion et la fonction de l'isoforme 1.
• En tant que régulateur clé de l'homéostasie des lymphocytes B, TNFSF13B se lie aux récepteurs TNFRSF13B (TACI) et TNFRSF17 (BCMA), et avec le ligand APRIL, forme une voie à deux ligands et deux récepteurs qui stimule la fonction des lymphocytes B et T et module l'immunité humorale.
• Son interaction avec le récepteur spécifique de BAFF, BAFFR (BR3), fournit un signal de survie essentiel pour les lymphocytes B matures et régule le nombre de lymphocytes B périphériques ainsi que la réponse lymphocytaire B.
• En plus de son rôle de cytokine, TNFSF13B peut agir comme facteur de transcription pour son propre gène en complexe avec NF-κB p50, en particulier dans les maladies lymphocytaires B auto-immunes et prolifératives ; l'isoforme Delta4BAFF est essentielle pour la libération de BAFF soluble par les monocytes stimulés par l'IFN-γ et pour la survie des lymphocytes B.
• Au niveau sous-cellulaire, TNFSF13B est exprimée comme une protéine transmembranaire de type II sur la membrane cellulaire, mais elle peut être clivée et sécrétée sous forme de cytokine soluble.
• L'expression tissulaire est abondante dans les leucocytes du sang périphérique, en particulier les monocytes et les macrophages, et on la trouve également dans la rate, les ganglions lymphatiques, la moelle osseuse, les lymphocytes T et les cellules dendritiques, avec des niveaux plus faibles dans le placenta, le cœur, le poumon et les tissus fœtaux ; l'isoforme 2 est exprimée dans de nombreuses lignées cellulaires myéloïdes.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation liée à N et une liaison disulfure ; la protéine contient une hélice transmembranaire et un domaine d'homologie TNF conservé, et elle est classée sous des mots-clés tels que cytokine, immunité et protéine sécrétée.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 90-160) de la TNFSF13B humaine, qui est une région fortement conservée entre les espèces ; cette conception explique la réactivité croisée observée avec la souris et le rat.
• Pour le Western blotting, le poids moléculaire théorique est d'environ 31 kDa ; des conditions réductrices sont recommandées pour la détection, mais notez que la glycosylation peut provoquer un léger décalage vers le haut.
• Lors de la réalisation d'immunohistochimie (IHC-P), des méthodes de récupération d'antigène telles que la récupération d'épithope induite par la chaleur (HIER) peuvent améliorer le signal ; une coupe de tissu fixée au formol et incluse à la paraffine de amygdale ou de ganglion lymphatique humain est un contrôle positif approprié.
• Pour l'immunofluorescence indirecte (IF/ICC), envisagez une perméabilisation pour détecter à la fois les pools membranaires et intracellulaires, car TNFSF13B peut être sécrétée et être présente dans l'appareil de Golgi.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; l'association avec un anticorps monoclonal ou un autre anticorps polyclonal dirigé contre un épitope non chevauchant est recommandée pour les immunoessais en sandwich.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence entre les lots doit être vérifiée ; incluez toujours des contrôles positifs et négatifs appropriés pour confirmer la spécificité dans le système d'échantillon choisi.

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