Anticorps polyclonal de lapin anti-TNFα pour WB et ELISA - P16599

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du TNFα

• Le TNFα, également connu sous le nom de cachectine ou membre 2 de la superfamille des ligands du facteur de nécrose tumorale, est une cytokine multifonctionnelle principalement sécrétée par les macrophages activés.
• Il exerce ses effets biologiques en se liant à TNFRSF1A/TNFR1 et TNFRSF1B/TNFBR, déclenchant des voies qui peuvent conduire à l'apoptose ou à la survie cellulaire.
• Cette cytokine est un puissant pyrogène, provoquant de la fièvre directement et en stimulant la sécrétion d'interleukine-1, et est impliquée dans l'induction de la cachexie.
• Le TNFα joue un rôle dans la résistance à l'insuline en inhibant la phosphorylation de la tyrosine IRS1 induite par l'insuline et en favorisant la dégradation de la protéine GKAP42 dans les adipocytes.
• Il synergise avec IL1B et IL6 pour promouvoir l'angiogenèse en induisant la production de VEGF, et stimule également l'ostéoclastogenèse, médiant ainsi la résorption osseuse.
• La forme du domaine intracellulaire (ICD) du TNFα, générée par un traitement protéolytique, peut induire la production d'IL12 dans les cellules dendritiques.
• Au niveau subcellulaire, le TNFα est localisé à la membrane cellulaire sous forme de protéine transmembranaire, mais peut être sécrété sous forme soluble après clivage.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la glycosylation, la myristoylation, la phosphorylation et la formation de ponts disulfures, qui sont critiques pour sa structure et sa fonction.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 80-235 du TNFα de rat, couvrant probablement le domaine extracellulaire ; considérez que l'anticorps polyclonal peut détecter à la fois le précurseur et les formes matures sécrétées.
• Pour le Western blot, une bande autour de 26kDa est attendue ; validez l'anticorps dans le système d'échantillon pertinent pour confirmer la spécificité, car des bandes supplémentaires issues d'intermédiaires de traitement ou de réactivité croisée peuvent apparaître.
• Compte tenu de la large réactivité croisée prédite, vérifiez la détection du TNFα humain, de souris et d'autres espèces en utilisant des témoins positifs appropriés.
• L'optimisation des facteurs de dilution et des conditions d'incubation est recommandée pour chaque essai (WB, ELISA) et matrice biologique.

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