Anticorps monoclonal de lapin anti-TNF-α pour WB, IP, IF/ICC, ELISA - P01375

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du TNF-α

• Le facteur de nécrose tumorale (TNF-α), également appelé cachectine, est une cytokine pléiotrope majoritairement sécrétée par les macrophages et classée dans la superfamille des ligands du facteur de nécrose tumorale (TNFSF2).
• Lors de sa liaison à ses récepteurs TNFRSF1A/TNFR1 et TNFRSF1B/TNFBR, il régule la mort cellulaire, la survie et les réponses inflammatoires.
• Le TNF-α est un pyrogène puissant qui induit la fièvre directement ou via la sécrétion d'interleukine-1, et est impliqué dans l'induction de la cachexie.
• Il altère la fonction des lymphocytes T régulateurs (Treg) dans la polyarthrite rhumatoïde en uprégulant la protéine phosphatase 1 (PP1), qui déphosphoryle FOXP3 au niveau du Ser-418, rendant les Tregs fonctionnellement défectueux. Références associées : PMID:23396208
• Il agit comme médiateur clé de la mort cellulaire dans l'action anticancéreuse des neutrophiles stimulés par le BCG associés à un mimétique DIABLO/SMAC dans les cellules du cancer de la vessie. Références associées : PMID:16829952, PMID:22517918, PMID:23396208
• Le TNF-α favorise l'angiogenèse en induisant la production de VEGF en synergie avec IL1B et IL6. Références associées : PMID:12794819
• Au niveau sous-cellulaire, le TNF-α existe sous forme de protéine transmembranaire sur la membrane cellulaire et est clivé en une forme sécrétée ; il est détecté à la fois sur la membrane et sous forme sécrétée.
• Mots-clés : cytokine, glycoprotéine, lipoprotéine, pont disulfure, phosphoprotéine, protéome de référence.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 77-233), donc l'anticorps peut détecter à la fois les formes transmembranaire et clivée soluble du TNF-α.
• Pour le Western blot, une bande proche de 26 kDa (forme complète) ou de 17 kDa (forme clivée) peut être observée selon la préparation de l'échantillon ; des conditions réductrices sont recommandées.
• En immunoprécipitation, vérifiez la compatibilité de l'anticorps avec la conformation native ; envisagez l'utilisation de tampons de lyse appropriés.
• Pour l'ELISA et l'immunofluorescence, validez dans des systèmes cellulaires appropriés (par exemple, macrophages stimulés au LPS) pour garantir la spécificité.

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