Anticorps polyclonal anti-TLR4 pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - O00206

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de TLR4

• TLR4 est un récepteur transmembranaire de reconnaissance de motifs qui reconnaît les motifs moléculaires associés aux pathogènes et aux dommages (PAMP et DAMP) pour déclencher des réponses immunitaires innées. Références associées : PMID:10835634 PMID:15809303 PMID:16622205
• Au niveau de la membrane plasmique, il coopère avec LY96 pour médier la réponse au lipopolysaccharide bactérien (LPS), et participe également à des réponses inflammatoires indépendantes du LPS envers les acides gras libres et les ions nickel. Références associées : PMID:27022195 PMID:20711192
• La signalisation peut se produire via une voie dépendante de MYD88 impliquant TIRAP et TRAF6, conduisant à l'activation de NF-kB et à la sécrétion de cytokines, ou via une internalisation médiée par CD14 qui déclenche un axe TICAM1-TBK1-IRF3 pour la production d'interféron de type I. Références associées : PMID:10835634 PMID:21393102 PMID:27022195 PMID:14517278
• En complexe avec TLR6, TLR4 promeut l'inflammation des monocytes/macrophages lors de la liaison à des ligands tels que les LDL oxydés ou le peptide bêta-amyloïde 42, conduisant à la production de chimiokines via les voies MYD88 et TICAM1. Références associées : PMID:23880187
• TLR4 se localise sur la membrane cellulaire, les endosomes précoces et les projections cellulaires telles que les ondulations membraneuses, ce qui facilite ses divers rôles de signalisation.
• L'expression tissulaire est élevée dans le placenta, la rate et les leucocytes du sang périphérique ; il est également détecté dans les monocytes, les macrophages, les cellules dendritiques et certaines cellules T, avec une expression aberrante dans les cellules du cancer pancréatique. Références associées : PMID:9237759 PMID:9435236 PMID:27022195 PMID:36232715
• De plus, TLR4 initie l'activation de l'inflammasome NLRP3 et participe à une boucle de rétroaction positive entre l'autophagie et la signalisation NF-kB, et est nécessaire à la migration des cellules du cancer pancréatique médiée par ZG16B/PAUF. Références associées : PMID:32894580

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire N-terminal (aa 27–228) du TLR4 humain, ce qui est susceptible de générer des anticorps reconnaissant à la fois le récepteur pleine longueur et d'éventuels fragments solubles ; confirmez l'identité de la cible avec des contrôles appropriés.
• En Western blot, une bande majeure proche de 96 kDa est attendue, mais une glycosylation variable peut produire des bandes supplémentaires ; validez la spécificité en utilisant des échantillons avec extinction ou knock-out du gène.
• Pour l'immunofluorescence et l'immunocytochimie, des profils de coloration de la membrane cellulaire et des endosomes sont attendus ; incluez des étapes de perméabilisation pour détecter les pools intracellulaires.
• La réactivité croisée rapportée de l'anticorps avec le TLR4 de souris nécessite une validation minutieuse dans le système de modèle murin concerné, car l'homologie de séquence peut influencer l'affinité de liaison.
• Cet anticorps polyclonal peut être utilisé pour l'immunoprécipitation et l'ELISA ; pensez à optimiser les conditions pour chaque application en raison de la nature multiligandique de TLR4.

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