Anticorps polyclonal anti-TIMM8A pour WB, IF/ICC, ELISA - O60220

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de TIMM8A

• TIMM8A (Translocase de la membrane interne mitochondriale 8A), également appelé DDP1, est une petite protéine d'environ 11 kDa localisée dans l'espace intermembranaire mitochondrial et la membrane interne.
• Il agit comme une protéine chaperonne qui facilite l'importation et l'assemblage des protéines transmembranaires à plusieurs passages dans la membrane interne mitochondriale, notamment TIMM23 et les transporteurs SLC25A12/A13. Il contribue également au transfert des précurseurs de protéines à bêta-baril du complexe TOM vers le complexe SAM.
• Il forme un complexe hétérohexamérique avec TIMM13 pour protéger les précurseurs hydrophobes de l'agrégation et les guider à travers l'espace intermembranaire.
• Les mutations du gène TIMM8A causent le syndrome de Mohr-Tranebjaerg (syndrome surdité-dystonie), ce qui démontre son rôle essentiel dans le développement neurologique.
• Il contient des résidus de cystéine conservés qui forment des ponts disulfures intramoléculaires et se lie aux ions zinc, éléments essentiels à la stabilité structurelle et à l'activité chaperonne.
• Il est fortement exprimé dans le cerveau fœtal et adulte, avec une expression supplémentaire dans le cœur, le foie, les reins et le muscle squelettique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, utilisez des lysats enrichis en mitochondries pour améliorer la détection de la bande de 11 kDa ; un gel Tris-glycine de 12 à 15 % avec des marqueurs de faible poids moléculaire est recommandé.
• En immunofluorescence/ICC, perméabilisez les cellules pour permettre à l'anticorps d'accéder à la membrane interne mitochondriale ; réalisez une co-coloration avec un marqueur mitochondrial pour étudier la colocalisation.
• L'immunogène (aa 1–97) couvre la protéine maturée pleine longueur, donc l'anticorps détecte probablement TIMM8A sous forme monomérique et complexée.
• Validez la réactivité par espèce en utilisant des lysats témoins positifs d'origine humaine, murine ou rat, comme l'indiquent les données de réactivité croisée.
• Pour l'ELISA, utilisez la protéine recombinante TIMM8A ou un peptide comme antigène de revêtement ; la réactivité croisée avec des membres proches de la famille comme TIMM8B doit être testée.
• Évitez des conditions réductrices excessives si l'épitope lié par un pont disulfure est essentiel à la reconnaissance.

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