Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-TIM-3/HAVCR2 pour WB, IHC-P, ELISA - Q8TDQ0

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de TIM-3/HAVCR2

• TIM-3 (récepteur cellulaire du virus de l'hépatite A 2) est une protéine transmembranaire de type I appartenant à la superfamille des immunoglobulines et à la famille TIM, également connue sous le nom de protéine 3 contenant un domaine d'immunoglobuline et de mucine des lymphocytes T (TIMD-3) et CD366.
• Fonctionne principalement comme un récepteur de point de contrôle immunitaire inhibiteur sur les lymphocytes T, atténuant la signalisation du TCR et favorisant l'épuisement des lymphocytes T ; il inhibe les réponses auto- et allo-immunitaires médiées par Th1, contribuant à la tolérance immunologique (PMID:14556005).
  Références connexes : PMID:14556005
• Agit comme un récepteur pour la galectine-9 (LGALS9), qui induit l'apoptose des lymphocytes T et supprime les fonctions effectrices, bien que cette interaction ait été débattue (PMID:16286920, PMID:24337741, PMID:23555261).
  Références connexes : PMID:16286920 PMID:24337741 PMID:23555261
• Se lie également à la phosphatidylsérine (PtSer) de manière dépendante du calcium, médiant la phagocytose des cellules apoptotiques et régulant l'immunité innée, en particulier dans les cellules dendritiques et les macrophages (PMID:24825777).
  Références connexes : PMID:24825777
• Exprimé dans divers sous-ensembles de cellules immunitaires : lymphocytes Th1, lymphocytes T régulateurs (Tregs), cellules dendritiques, cellules natural killer (NK) et tissus épithéliaux ; l'expression est régulée à la hausse dans les infections virales chroniques telles que le VHC et le VIH, contribuant à l'épuisement immunitaire.
• Joue un double rôle dans l'immunité innée : sur les cellules NK, il peut améliorer la production d'IFN-gamma en réponse à la LGALS9 (PMID:22323453) ou supprimer la cytotoxicité médiée par les cellules NK (PMID:22383801).
  Références connexes : PMID:22323453 PMID:22383801
• Subit des modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation, la palmitoylation et la phosphorylation ; possède des ponts disulfure et un domaine de type V semblable aux Ig essentiel pour la liaison du ligand.
• Localisation subcellulaire : principalement sur la membrane cellulaire et aux jonctions cellulaires, où elle participe à la formation et à la signalisation de la synapse immunitaire.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène est une protéine recombinante correspondant au domaine extracellulaire (aa22-202), qui convient pour la détection de TIM-3 natif et dénaturé en WB, IHC-P et ELISA.
• Pour l'analyse par Western Blot (WB), envisagez d'utiliser des conditions réductrices et des lysats cellulaires totaux de Jurkat ou de lymphocytes T primaires activés pour confirmer la bande attendue à environ 33 kDa, bien que la glycosylation puisse provoquer un poids moléculaire apparent plus élevé.
• Pour l'IHC-P, des méthodes de récupération d'antigène (par exemple, tampon citrate, pH 6,0) peuvent être nécessaires ; validez le motif de coloration dans les tissus d'amygdales ou de ganglions lymphatiques humains, avec des témoins négatifs appropriés.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être testé comme réactif de capture ou de détection ; effectuez des titrations en damier avec du TIM-3 recombinant enrobé et des échantillons positifs connus.
• Compte tenu de la réactivité croisée rapportée avec la souris et le rat, envisagez de vérifier l'homologie de séquence de la région de l'immunogène entre les espèces, et validez l'anticorps dans des modèles de rongeurs pertinents (par exemple, lysats de rate de souris, coupes de tissus de rat).

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