Anticorps monoclonal de lapin anti-Thymidine Kinase 1 (TK1) pour WB et ELISA - P04183

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Thymidine Kinase 1

• La Thymidine Kinase 1 (TK1) est une enzyme régulée par le cycle cellulaire, essentielle au métabolisme des nucléotides. Références associées : PMID:9575153
• Elle catalyse la conversion de la thymidine en thymidine monophosphate, première étape de la voie de récupération de la synthèse de l'ADN. Références associées : PMID:22385435
• L'expression de TK1 est transcriptionnellement limitée à la phase S du cycle cellulaire, coïncidant avec les oscillations transitoires de la concentration intracellulaire de dTTP.
• L'enzyme phosphoryle également les prodrogues à base d'analogues de nucléosides, notamment les agents anticancéreux et antiviraux comme l'AraC et l'AZT. Références associées : PMID:22385435
• La localisation subcellulaire est majoritairement cytoplasmique.
• La protéine a un poids moléculaire d'environ 25,5 kDa et contient des domaines de liaison à l'ATP et aux métaux (zinc), ainsi que des sites de phosphorylation et d'acétylation.
• TK1 appartient à la famille des thymidine kinases et fait partie du protéome de référence.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le Western blot (WB), utilisez des conditions standard de SDS-PAGE réducteur et de transfert. Le poids moléculaire prédit de la protéine cible est d'environ 25 kDa ; prévoyez un marqueur de protéines pré-coloré pour confirmer le poids moléculaire. Validez la spécificité de l'anticorps dans des lignées cellulaires connues pour exprimer TK1, idéalement après synchronisation pour enrichir la population en cellules de phase S.
• Pour l'ELISA, la séquence de l'immunogène (acides aminés 1 à 100) peut être utilisée pour revêtir les plaques pour une ELISA directe. Alternativement, un format de capture utilisant l'anti-TK1 comme réactif de détection peut être développé ; optimisez les conditions de revêtement et de blocage.
• Compte tenu de l'expression dépendante du cycle cellulaire, l'intensité du signal peut varier ; intégrez des contrôles appropriés (par exemple, lysats de phase G1 vs phase S) pour évaluer la spécificité.

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