Anticorps polyclonal anti-TGM3 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q08188

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la TGM3/Transglutaminase 3

• La Transglutaminase 3 (TGM3), également désignée TGase E, TG(E), TGE ou UHS2, est une enzyme dépendante du calcium appartenant à la famille des transglutaminases.
• La TGM3 catalyse la formation de liaisons isopeptidiques entre les résidus glutamine et lysine des protéines, ainsi que la conjugaison de polyamines aux protéines, modifiant ainsi la structure et la stabilité des protéines.
• Elle est essentielle à la formation de l'enveloppe cornée (CE) dans les kératinocytes en différenciation terminale, où elle réticule les petites protéines riches en proline (SPRR1 et SPRR2) et la loricrine (LOR) en oligomères qui sont ensuite assemblés par la TGM1 sur l'échafaudage de la CE en croissance.
• Dans les follicules pileux, la TGM3 contribue au durcissement de la gaine radiculaire interne en réticulant les protéines structurales, un processus crucial pour l'intégrité et la résistance de la tige pilaire.
• La protéine est principalement localisée dans le cytoplasme et est sujette à des modifications post-traductionnelles telles que l'acétylation et la phosphorylation ; elle est produite sous forme de zymogène nécessitant un clivage protéolytique pour son activation.
• Les annotations UniProt notent également que la TGM3 est une acyltransférase liant les métaux avec une structure 3D connue, et qu'elle a été identifiée dans des analyses protéomiques (mots-clés : Acétylation, Phosphoprotéine, Zymogène, Structure 3D).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'anticorps a été produit contre une protéine recombinante couvrant la région N-terminale (acides aminés 1-180) de la TGM3 humaine, ce qui devrait permettre de reconnaître la TGM3 pleine longueur et potentiellement les variants d'épissage incluant ce segment.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d'environ 77 kDa ; l'utilisation d'un gel à gradient 4-20% ou d'un gel SDS-PAGE à 8% est recommandée. Inclure des contrôles positifs appropriés (par exemple, des lysats de kératinocytes) et valider la spécificité de l'anticorps dans les échantillons pertinents.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), étant donné que la TGM3 est cytoplasmique, envisagez d'optimiser les conditions de fixation cellulaire et de perméabilisation pour assurer une pénétration adéquate de l'anticorps tout en préservant l'antigénicité.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut servir de réactif de détection ou de capture après avoir confirmé ses performances avec l'antigène purifié ou des échantillons biologiques ; valider dans la matrice d'échantillon pertinente.
• Selon les données du fournisseur, l'anticorps est réactif avec la TGM3 humaine et murine ; valider la réactivité croisée dans votre système modèle d'intérêt avant les dosages quantitatifs.
• Toujours titrer l'anticorps pour chaque application et inclure des contrôles appropriés pour exclure toute liaison non spécifique.

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