Anticorps polyclonal de lapin anti-TGF bêta Récepteur II (TGFBR2) pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P37173

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du récepteur du TGF-bêta de type 2

• Identité et structure du récepteur : Le récepteur du TGF-bêta de type 2 (TGFBR2) est une sérine/thréonine kinase transmembranaire de type I à passage unique qui sert de récepteur à haute affinité pour les cytokines TGF-bêta TGFB1, TGFB2 et TGFB3. Il est codé par le gène TGFBR2 sur le chromosome 3 humain, l'épissage alternatif produisant de multiples isoformes, dont certaines sont liées au cancer colorectal héréditaire sans polypose, à l'anévrisme aortique et à la craniosynostose.
• Signalisation canonique dépendante de SMAD : Après liaison du ligand, TGFBR2 s'associe à deux récepteurs de type I (TGFBR1) pour former un complexe hétérotétramérique. Le domaine kinase constitutivement actif de TGFBR2 phosphoryle TGFBR1, qui active à son tour SMAD2 et SMAD3. Les SMAD phosphorylés se complexent avec SMAD4 et se transloquent vers le noyau pour réguler la transcription des gènes cibles du TGF-bêta, contrôlant l'arrêt du cycle cellulaire, l'apoptose, la différenciation et la production de matrice extracellulaire.
• Signalisation non canonique : En plus de la voie SMAD canonique, TGFBR2 engage des cascades indépendantes de SMAD, y compris les voies MAP kinase, PI3K/AKT et GTPase de type Rho, pour moduler la migration, la prolifération et la survie cellulaire.
• Liaison et affinité du ligand : TGFBR2 lie TGFB1, TGFB2 et TGFB3 dans la gamme d'affinité picomolaire sans nécessiter de co-récepteurs, médiant l'étape initiale de la transduction du signal TGF-bêta.
• Localisation subcellulaire : TGFBR2 se localise principalement à la membrane cellulaire et aux radeaux membranaires, avec des preuves d'une forme sécrétée détectée dans les environnements extracellulaires, ce qui est cohérent avec son rôle dans la communication intercellulaire.
• Modifications post-traductionnelles : Le récepteur est une glycoprotéine avec de multiples ponts disulfure intramoléculaires essentiels à sa structure tertiaire. Il subit une phosphorylation sur des résidus sérine et thréonine dans son domaine kinase et sa queue cytoplasmique, ce qui module son activité et sa signalisation en aval.
• Résumé des mots-clés : La fiche UniProt met en évidence son implication dans l'apoptose, la régulation de la croissance, la différenciation et les associations avec des maladies telles que l'anévrisme aortique, la craniosynostose et le cancer colorectal héréditaire sans polypose.

Guide expérimental et conseils techniques

• Conception de l'immunogène : L'anticorps a été produit contre une protéine recombinante englobant les acides aminés 23–280 du TGFBR2 humain, qui couvre le domaine extracellulaire N-terminal de liaison au ligand. Cette région est relativement conservée entre l'homme, la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée ; cependant, les modèles de glycosylation endogène peuvent influencer l'accessibilité de l'épitope dans les échantillons natifs.
• Considérations pour le Western blot (WB) : Le poids moléculaire prédit de TGFBR2 est d'environ 65 kDa ; cependant, en raison de la glycosylation, vous pouvez observer un décalage de bande. Utilisez des conditions réductrices pour une résolution claire. Validez dans des lysats de contrôle positif (par exemple, HeLa, A549) connus pour exprimer TGFBR2.
• Conseils pour l'immunohistochimie (IHC-P) : Pour les coupes incluses en paraffine, optimisez la récupération antigénique (par exemple, tampon citrate pH 6,0 ou EDTA pH 9,0) et envisagez de tester plusieurs concentrations d'anticorps primaire (plage typique 1:50–1:500). Une coloration membranaire est attendue ; l'inclusion d'un inhibiteur de phosphatase dans les tampons de blocage peut aider à préserver les épitopes dépendants de la phosphorylation.
• Guide pour l'immunofluorescence (IF/ICC) : Étant donné que TGFBR2 est un récepteur transmembranaire, une perméabilisation avec du Triton X-100 ou de la saponine est nécessaire pour la détection de l'épitope intracellulaire. Une co-coloration avec des marqueurs membranaires ou d'organites est recommandée pour confirmer la localisation. L'anticorps peut également reconnaître la forme sécrétée, une fixation soigneuse est donc conseillée pour éviter un fond extracellulaire.
• Utilisation en ELISA : Cet anticorps polyclonal peut être exploré comme réactif de capture ou de détection dans des formats ELISA sandwich. Effectuez des titrages en damier pour déterminer les concentrations optimales de revêtement (1–10 µg/mL) et de détection, et validez avec des étalons de protéine TGFBR2 recombinante.

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