Anticorps polyclonal de lapin anti-TFF3 pour WB, IF-P, ELISA - Q07654

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de TFF3

• Le facteur trefoil 3 (TFF3), également appelé facteur trefoil intestinal (hITF), est une petite protéine sécrétée appartenant à la famille des facteurs trefoil, caractérisée par un domaine trefoil conservé.
• TFF3 joue un rôle essentiel dans le maintien et la réparation de la muqueuse intestinale, en favorisant la restitution épithéliale et en agissant comme motogène pour stimuler la migration cellulaire lors de la cicatrisation.
• La protéine est principalement exprimée dans les cellules caliciformes de l'intestin grêle, du gros intestin et du côlon ; une expression supplémentaire a été rapportée dans l'utérus et certains noyaux hypothalamiques (noyaux paraventriculaire, periventriculaire et supraoptique).
• TFF3 est synthétisé sous forme de précurseur avec un peptide signal et est sécrété dans l'espace extracellulaire, où il peut interagir avec les mucines pour stabiliser la couche de mucus.
• Au niveau subcellulaire, TFF3 est localisé dans la matrice extracellulaire, il est sécrété et également détecté dans le cytoplasme, ce qui est cohérent avec son transit par la voie de sécrétion.
• La protéine mature contient des liaisons disulfure intramoléculaires qui stabilisent sa structure de domaine trefoil, essentielle pour son activité biologique et sa résistance à la protéolyse.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région du peptide mature (aa 22-94) du TFF3 humain, ce qui suggère que l'anticorps reconnaît probablement la forme sécrétée et active de la protéine.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 9 kDa est attendue, ce qui correspond à la forme monomère de TFF3 ; les conditions réductrices peuvent rompre les liaisons disulfure. Envisagez d'utiliser des marqueurs de faible poids moléculaire et des temps de transfert optimisés pour les membranes PVDF.
• Pour l'immunofluorescence, la fixation au paraformaldéhyde et la perméabilisation sont recommandées pour détecter à la fois le TFF3 intracellulaire et extracellulaire. Validez l'expérience sur des coupes de tissu intestinal ou colique.
• En ELISA, envisagez de l'associer à un anticorps de capture ciblant un épitope différent si vous développez un test sandwich ; l'anticorps polyclonal de lapin peut servir de réactif de détection.

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