Anticorps polyclonal de lapin anti-TFAM pour WB, IF/ICC, ELISA - Q00059

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de TFAM

• TFAM (Facteur de transcription A mitochondrial), également appelé MtTF1, TCF-6 et TCF6L2, est un facteur de transcription mitochondrial clé codé par le noyau qui régule l'expression des gènes mitochondriaux.
• Il forme le complexe d'initiation de la transcription mitochondriale avec TFB2M et POLRMT, essentiel pour la transcription basale de l'ADN mitochondrial (ADNmt).
  Références associées : PMID:29149603
• TFAM se lie aux promoteurs du brin léger et HSP1, courbe l'ADN en un virage en U via ses domaines boîte-HMG pour recruter POLRMT et faciliter l'initiation de la transcription.
  Références associées : PMID:22037172, PMID:1737790
• Au-delà de la transcription, TFAM est critique pour le maintien et la condensation de l'ADNmt ; il compacte l'ADNmt en nucléoïdes, et son dosage régule étroitement le nombre de copies d'ADNmt.
  Références associées : PMID:19304746, PMID:22841477, PMID:22037171
• En coopération avec TFB2M, TFAM permet l'ouverture du promoteur et le piégeage du brin non matrice de l'ADN, une étape cruciale pour une transcription précise.
  Références associées : PMID:20410300
• TFAM se localise dans la matrice mitochondriale et les nucléoïdes, où il joue également un rôle dans le désenroulement et l'organisation de l'ADNmt.
• Il subit un épissage alternatif et une phosphorylation ; les variants associés à des maladies sont liés à des maladies mitochondriales primaires.
• En tant que membre de la famille HMGB, TFAM utilise ses boîtes HMG en tandem pour lier, courber et former des boucles d'ADNmt, contribuant à l'architecture du nucléoïde.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale 1–220 de la TFAM humaine, qui inclut les domaines boîte-HMG en tandem ; par conséquent, l'anticorps est susceptible de reconnaître la TFAM pleine longueur.
• Pour le Western blotting, envisagez d'utiliser des lysats enrichis en mitochondries pour une détection optimale ; le poids moléculaire prédit est d'environ 29 kDa, mais les modifications post-traductionnelles peuvent entraîner un décalage.
• Pour l'immunofluorescence (IF) et l'ICC, attendez un motif de coloration ponctué mitochondrial ; un co-marquage avec un marqueur mitochondrial est recommandé pour confirmer la localisation.
• Lors de la réalisation d'un ELISA, titrez l'anticorps contre la TFAM recombinante ou des lysats cellulaires pour établir les dilutions de travail optimales.
• En raison de la forte conservation de la séquence chez l'homme, la souris et le rat, la réactivité croisée est probable, mais validez l'anticorps dans votre système modèle.

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