Anticorps polyclonal de lapin Anti-TEK (TIE2) pour WB, ELISA - Q02763

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de TEK (Récepteur de l'angiopoïétine-1)

• TEK est un récepteur de surface cellulaire à activité tyrosine-protéine kinase pour les angiopoïétines (ANGPT1, ANGPT2, ANGPT4) qui régule de manière critique l'angiogenèse, la survie des cellules endothéliales, la prolifération, la migration, l'adhésion et la réorganisation du cytosquelette.
• Il maintient la quiescence vasculaire en empêchant la fuite des protéines plasmatiques pro-inflammatoires et des leucocytes, tout en favorisant la stabilité vasculaire dans l'endothélium au repos.
• La signalisation de TEK dépend du contexte : dans les vaisseaux quiescents avec des contacts cellulaires serrés, ANGPT1 recrute TEK vers les jonctions intercellulaires et active préférentiellement la voie PI3K/AKT1 ; dans les cellules endothéliales migrantes dépourvues d'adhérences, TEK se localise dans les adhérences focales et stimule l'angiogenèse par bourgeonnement via les cascades PTK2/FAK et MAPK1/ERK2/MAPK3/ERK1.
• La modulation est effectuée par ANGPT2 de plus faible affinité, qui peut agir comme antagoniste compétitif d'ANGPT1, par hétérodimérisation avec TIE1, et par clivage protéolytique qui libère un récepteur leurre extracellulaire soluble.
• Au niveau subcellulaire, TEK se trouve à la membrane cellulaire, aux jonctions cellule-cellule et aux adhérences focales ; il est également détecté dans le cytoplasme, associé au cytosquelette, et sécrété sous forme d'ectodomaine soluble.
• L'expression est majoritairement dans les cellules endothéliales et leurs progéniteurs (angioblastes), avec les niveaux les plus élevés dans le placenta et le poumon ; la forme soluble est détectable dans le plasma sanguin.
• Les modifications post-traductionnelles clés comprennent l'autophosphorylation dépendante du ligand sur les résidus tyrosine, la glycosylation, la formation de ponts disulfure et l'ubiquitination.
• TEK est essentiel pour l'angiogenèse embryonnaire, le développement cardiaque et l'hématopoïèse postnatale.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 500 à 750 du domaine cytoplasmique ; on s'attend à ce que l'anticorps reconnaisse la partie intracellulaire de TEK. Pour le Western blot, une bande proche de 126 kDa doit être détectée dans des conditions réductrices ; envisagez d'utiliser des lysats enrichis en membrane ou des lysats cellulaires complets de cellules endothéliales.
• La réactivité croisée avec l'humain, la souris et le rat permet des études sur les organismes modèles courants. Validez la réactivité spécifique à l'espèce dans votre système expérimental avant utilisation.
• Pour les applications ELISA, l'association avec un anticorps de détection dirigé contre un épitope non chevauchant peut améliorer la sensibilité. Optimisez les conditions de revêtement de l'antigène et de blocage pour votre format de plaque.
• Le traitement protéolytique produit un fragment extracellulaire soluble d'environ 75 kDa ; celui-ci peut apparaître dans les milieux de culture conditionnés ou les échantillons de plasma. Ajustez la préparation de l'échantillon en conséquence si vous ciblez la partie extracellulaire.

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