Anticorps monoclonal de lapin anti-TdT pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P04053

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la TdT

• La désoxynucléotidyltransférase terminale (TdT), codée par le gène DNTT, est une ADN polymérase indépendante d’une matrice qui catalyse l’ajout aléatoire de désoxynucléosides triphosphates à l’extrémité 3'-OH des amorces d’ADN.
• La TdT joue un rôle essentiel dans la recombinaison V(D)J en ajoutant des nucléotides non codés par la matrice (N) aux jonctions des segments des gènes de la chaîne lourde des immunoglobulines et des récepteurs des lymphocytes T au cours de la maturation des lymphocytes B et T.
• L’enzyme nécessite des ions métalliques divalents, tels que le magnésium, pour son activité catalytique, comme l’indiquent les mots-clés UniProt « Magnesium » et « Metal-binding ».
• La TdT est principalement localisée dans le noyau, où elle s’associe à la machinerie de recombinaison afin de générer une diversité jonctionnelle.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, comme l’indique le mot-clé « Phosphoprotein », laquelle peut réguler l’activité enzymatique ou les interactions protéiques.
• L’épissage alternatif du transcrit DNTT produit plusieurs isoformes, comme le mentionne le mot-clé « Alternative splicing », ce qui pourrait influencer leur spécialisation fonctionnelle.
• La structure tridimensionnelle de la protéine a été résolue (mot-clé « 3D-structure »), fournissant des informations sur le mécanisme moléculaire de l’ajout de nucléotides indépendant d’une matrice.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène englobe les acides aminés 10 à 124 de la TdT humaine, une région susceptible de générer des anticorps reconnaissant la protéine native ; envisagez de vérifier la réactivité avec la TdT endogène dans des modèles lymphocytaires pertinents.
• Pour le western blot, une bande d’environ 58–59 kDa est attendue ; validez la détection dans des extraits nucléaires de thymus ou de lignées cellulaires leucémiques connues pour exprimer la TdT.
• En immunofluorescence ou en immunohistochimie, prévoyez un marquage nucléaire ; incluez des étapes appropriées de perméabilisation et confirmez la spécificité du signal à l’aide d’échantillons négatifs pour la TdT ou de témoins knock-out.
• L’anticorps peut être adapté à la quantification par ELISA de la TdT recombinante ou purifiée ; optimisez l’antigène de revêtement et le format de détection pour votre système d’analyse.

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