Anticorps monoclonal anti-TDP-43/TARDBP pour WB, IP, IF, IHC, ChIP - Q13148

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de TDP-43

• La protéine de liaison à l'ADN TAR 43 (TDP-43) est codée par le gène TARDBP et est également connue sous le nom d'ALS10. Elle appartient à la famille des hnRNP et contient deux motifs de reconnaissance de l'ARN (RRM) et un domaine C-terminal riche en glycine.
• Fonctionne comme une protéine de liaison à l'ARN impliquée dans de multiples étapes de la biogenèse et du traitement de l'ARN (PubMed:23519609). Références associées : PMID:23519609
• Se lie préférentiellement aux répétitions GU via ses RRM, se localisant dans les longs introns et les régions 3'UTR des ARNm, régulant ainsi l'épissage de nombreux ARN, y compris ceux critiques pour la survie neuronale et la neurodégénérescence (PubMed:23519609, PubMed:24240615, PubMed:24464995, PubMed:21358640, PubMed:29438978). Références associées : PMID:23519609, PMID:24240615, PMID:24464995, PMID:21358640, PMID:29438978
• Joue un rôle dans le maintien de l'homéostasie mitochondriale en traitant les transcrits mitochondriaux (PubMed:28794432) et régule la stabilité des ARNm en recrutant la déadénylase sur la région 3'UTR (PubMed:30520513). Références associées : PMID:28794432, PMID:30520513
• En réponse au stress oxydatif, s'associe aux granules de stress et aux ribosomes bloqués pour favoriser la survie cellulaire (PubMed:19765185, PubMed:23398327). Références associées : PMID:19765185, PMID:23398327
• Se localise dans le noyau, le cytoplasme, les granules de stress et les mitochondries. Exprimée de manière ubiquitaire, avec des niveaux particulièrement élevés dans le pancréas, le placenta, le poumon, les voies génitales et la rate.
• Subit des modifications post-traductionnelles incluant la phosphorylation, la méthylation et l'ubiquitination, qui régulent sa fonction et sa propension à l'agrégation. Les mutations et la mauvaise localisation sont liées à la sclérose latérale amyotrophique (SLA) et à la dégénérescence lobaire frontotemporale (DLFT).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène cible la région C-terminale (aa 300-400) du TDP-43 humain, qui peut reconnaître à la fois les formes complètes et clivées ; tenez-en compte lors de l'interprétation des profils de bandes en Western blot.
• Pour le Western blot, une bande prédominante autour de 45 kDa est attendue ; utilisez des contrôles positifs appropriés tels que des lysats de tissus HeLa ou cérébraux et validez dans votre système d'échantillons.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat a été documentée ; confirmez les performances dans vos conditions expérimentales, en particulier pour l'immunohistochimie où la fixation et la récupération antigénique peuvent affecter la coloration.
• En immunohistochimie (IHC), optimisez la récupération antigénique (par exemple, tampon citrate pH 6,0 ou EDTA pH 9,0) et les conditions de détection pour chaque type de tissu.
• Pour l'immunoprécipitation (IP) et l'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), vérifiez l'adéquation de l'anticorps pour la liaison aux protéines natives ; notez que TDP-43 est principalement une protéine de liaison à l'ARN, et les interactions avec l'ADN peuvent nécessiter une optimisation de la réticulation.
• Cet anticorps a été utilisé en ELISA ; cependant, les conditions individuelles du test (par exemple, tampon de revêtement, agent de blocage) doivent être optimisées pour atteindre la sensibilité souhaitée.

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