Anticorps polyclonal anti-TBC1D4 pour WB, IF/ICC, ELISA - O60343

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de TBC1D4

• TBC1D4 (membre 4 de la famille des domaines TBC1), également appelée AS160 (substrat d'Akt de 160 kDa), est une protéine activant les GTPases (GAP) qui régule les petites GTPases Rab, notamment RAB2A, RAB8A, RAB10 et RAB14, et contrôle le trafic de vésicules intracellulaires.
• L'isoforme 2 de TBC1D4 favorise la translocation induite par l'insuline du transporteur de glucose SLC2A4/GLUT4 vers la membrane plasmique, augmentant ainsi l'absorption du glucose, un processus essentiel de la régulation métabolique.
• TBC1D4 est largement exprimée : l'isoforme 1 est fortement exprimée dans le muscle squelettique et le cœur, tandis que l'isoforme 2 montre une forte expression dans les glandes surrénales et thyroïdiennes, le poumon, le rein, le côlon, le cerveau et le tissu adipeux.
• Au niveau protéique, TBC1D4 est exprimée dans les îlots pancréatiques (y compris les cellules bêta) et son expression est diminuée de moitié chez les patients atteints de diabète de type 2, ce qui l'associe à la pathologie du diabète.
• TBC1D4 est une protéine cytoplasmique qui subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation et la méthylation, qui modulent son activité et sa localisation subcellulaire.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes de TBC1D4, ce qui contribue à sa diversité fonctionnelle spécifique aux tissus.
• TBC1D4 est régulée à la hausse dans les lymphocytes T des patients atteints de dermatite atopique, ce qui suggère des rôles potentiels dans la fonction immunitaire.

Conseils expérimentaux et techniques

• Pour le western blot, attendez une bande à environ 147 kDa ; envisagez d'utiliser un échelle de protéines de haut poids moléculaire et des conditions de transfert optimisées pour les grandes protéines.
• La séquence de l'immunogène (aa 1059–1298) se trouve en aval du motif connu de substrat d'Akt phosphorylé ; vérifiez si l'anticorps reconnaît à la fois les formes phosphorylées et non phosphorylées selon vos besoins expérimentaux.
• Cet anticorps a une réactivité croisée avec TBC1D4 de souris et de rat ; validez sa spécificité dans les lysats de tissus concernés (par exemple muscle squelettique, tissu adipeux) et incluez des contrôles appropriés.
• Pour l'immunofluorescence, la détection cytoplasmique peut nécessiter une perméabilisation au Triton X-100 ou à la saponine ; optimisez la fixation et le blocage pour préserver l'antigénicité et réduire le bruit de fond.
• En ELISA, utilisez l'immunogène recombinant comme contrôle positif pour établir les courbes d'étalonnage et déterminer la sensibilité du test.

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