Anticorps polyclonal anti-SYNJ1 pour WB et ELISA - O43426

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la SYNJ1

• La SYNJ1, également appelée Synaptojanine-1, est une phosphatase des phosphoinositides qui hydrolyse les groupements phosphate des phosphoinositides et des phosphates d’inositol de manière spécifique au domaine.
  Références associées : PMID:10224048 PMID:18093523 PMID:23804563
• Le domaine 5-phosphatase catalyse l’élimination du 5-phosphate de substrats tels que PtdIns(4,5)P2, PtdIns(3,4,5)P3, Ins(1,4,5)P3 et Ins(1,3,4,5)P4.
  Références associées : PMID:18093523 PMID:23804563 PMID:27435091
• Le domaine SAC hydrolyse les phosphates en positions 3 et 4 du cycle de l’inositol, en ciblant PI(3)P, PI(4)P et PI(3,5)P2.
  Références associées : PMID:10224048 PMID:18093523 PMID:23804563
• La SYNJ1 se localise dans le cytoplasme, la région périnucléaire, la présynapse et la membrane.
• Elle joue un rôle essentiel dans le recyclage des vésicules synaptiques en participant à l’endocytose ultrarapide et au désassemblage de la clathrine, régulant ainsi la libération des neurotransmetteurs et la plasticité synaptique.
• Les mutations de SYNJ1 sont associées à des troubles neurologiques, notamment l’encéphalopathie épileptique à début précoce (DEE53, EIEE53) et la maladie de Parkinson autosomique récessive (PARK20).
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation et la méthylation, et la protéine contient des domaines de liaison à l’ARN.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 100 à 200 de la SYNJ1 humaine, une région N-terminale potentiellement conservée entre les isoformes. Il est recommandé de valider la spécificité de l’anticorps au moyen d’essais de compétition avec le peptide ou de contrôles utilisant des fragments recombinants.
• Pour le Western blot dans des conditions réductrices et dénaturantes, prévoir une bande à ~173 kDa ; compte tenu de la grande taille de la protéine, optimiser les temps de transfert et utiliser un gel de polyacrylamide à faible pourcentage afin d’améliorer la résolution.
• Dans les applications ELISA, évaluer l’affinité et la spécificité de liaison vis-à-vis de la protéine SYNJ1 recombinante pleine longueur ou du peptide immunogène, et ajuster les concentrations d’anticorps pour obtenir un rapport signal/bruit optimal.
• Compte tenu de la réactivité croisée avec le rat, veiller à utiliser des lysats témoins ou des protéines recombinantes soigneusement appariés à l’espèce afin de confirmer la détection dans les modèles de rongeurs.

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