Anticorps Monoclonal Anti-SUPT5H/SPT5 pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - O00267

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de SUPT5H/SPT5

• SPT5 (SUPT5H) est la grande sous-unité du complexe du facteur inducteur de sensibilité à la DRB (DSIF), qui régule le traitement de l'ARNm et l'élongation de la transcription par l'ARN polymérase II.
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• DSIF régule positivement la coiffe de l'ARNm en stimulant l'activité guanylyltransférase de l'ARNm de RNGTT/CAP1A.
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• DSIF coopère avec le complexe du facteur d'élongation négative (NELF) pour améliorer la pause transcriptionnelle sur les sites proximaux du promoteur, facilitant l'assemblage d'un complexe d'ARN polymérase II compétent pour l'élongation.
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• DSIF et NELF favorisent la mise en pause en inhibant le facteur d'élongation transcriptionnelle TFIIS/S-II, qui stimule l'activité nucléasique intrinsèque de l'ARN polymérase II pour cliver les transcrits bloqués, favorisant la reprise de la transcription.
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• Suite à la phosphorylation par CDK9, DSIF peut passer à un facteur d'élongation positif, permettant une élongation transcriptionnelle productive.
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• SPT5 est essentiel pour l'activation transcriptionnelle médiée par Tat du VIH-1, supprimant la mise en pause et empêchant la terminaison prématurée des transcrits viraux.
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• SPT5 se localise principalement dans le noyau et est exprimé de manière ubiquitaire dans les tissus.

• SPT5 subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation, la méthylation et l'ubiquitination, reflétant sa régulation dynamique dans la transcription.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène a été conçu à partir d'un peptide synthétique situé dans les acides aminés 800–900 du SPT5 humain (région C-terminale). Cette région est probablement conservée chez l'humain, la souris et le rat, ce qui concorde avec la réactivité croisée signalée.
• Pour le transfert Western (WB), le SPT5 endogène est détecté à environ 121 kDa. Envisagez d'utiliser des lysats enrichis en noyau pour améliorer le signal, compte tenu de sa localisation nucléaire.
• Dans les essais d'immunoprécipitation (IP), les performances de l'anticorps peuvent dépendre de l'accessibilité de l'épitope ; validez dans le système d'échantillon pertinent.
• Pour l'immunocytochimie (IF/ICC) et l'immunohistochimie (IHC-P), prévoyez un marquage nucléaire. Des procédures adéquates de perméabilisation et de récupération de l'antigène peuvent être nécessaires pour des résultats optimaux.
• Pour les applications ELISA, il est recommandé de coupler avec des anticorps de capture/détection ciblant des épitopes non chevauchants pour assurer la spécificité.
• Titrez l'anticorps dans vos conditions d'essai spécifiques, car les concentrations de travail optimales peuvent varier en fonction du type d'échantillon et de la méthode de détection.

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