Anticorps polyclonal de lapin anti-SUMO3 pour WB, IF/ICC, ELISA - P55854

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SUMO3

• SUMO3 (Small Ubiquitin-related Modifier 3) est une protéine de type ubiquitine codée par le gène SUMO3 (GeneID : 6612). C'est un membre de la famille SUMO, également connu sous les noms SMT3A, Smt3B, SMT3H1 ou SUMO-2.
• Contrairement à l'ubiquitine, SUMO3 agit principalement comme un modificateur post-traductionnel qui ne cible pas les protéines pour leur dégradation ; il peut au contraire antagoniser la protéolyse dépendante de l'ubiquitine. Il est lié de manière covalente aux lysines cibles sous forme de monomère ou de polymère.
• Le processus de conjugaison requiert une enzyme activatrice E1 (SAE1-SAE2), une enzyme de conjugaison E2 (UBE2I), et est favorisé par des ligases E3 telles que PIAS1-4, RANBP2 ou CBX4. Références associées : PMID:11451954, PMID:18538659, PMID:21965678
• SUMO3 participe au transport nucléaire, à la réplication et la réparation de l'ADN, à la mitose et à la transduction du signal. Il est également essentiel pour la régulation de la sumoylation de SETX. Références associées : PMID:24105744
• Au niveau sous-cellulaire, SUMO3 est présent dans le cytoplasme, le noyau et les corps nucléaires PML.
• Il est exprimé majoritairement dans le foie, avec un poids moléculaire prédit de 11,6 kDa (migrant à ~12 kDa en SDS-PAGE).
• Les mots-clés UniProt incluent : structure 3D, épissage alternatif, liaison isopeptidique, identification protéomique et voie de conjugaison Ubl.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• En raison de la petite taille de SUMO3 (~12 kDa), utilisez des gels SDS-PAGE à 15% ou des gels à gradient pour une résolution optimale en Western blot, et assurez un transfert efficace sur les membranes PVDF avec des seuils de coupure pour bas poids moléculaire.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), fixez les cellules avec 4% de paraformaldéhyde et perméabilisez-les avec 0,1 à 0,2% de Triton X-100 pour permettre à l'anticorps d'accéder à SUMO3 localisé dans le noyau et les corps PML.
• Validez la spécificité de l'anticorps dans les lignées cellulaires ou tissus concernés ; SUMO3 est fortement exprimé dans le foie, donc HepG2 ou les hépatocytes primaires peuvent servir de contrôles positifs.
• Étant donné que cet anticorps polyclonal peut reconnaître à la fois les formes libres et conjuguées, envisagez d'utiliser 1% de SDS ou d'autres conditions dénaturantes pour réduire la liaison non spécifique en ELISA.

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