Anticorps monoclonal anti-STK3/MST2 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q13188

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de STK3/MST2

• STK3/MST2 est une sérine/thréonine-protéine kinase pro-apoptotique activée par le stress qui, après clivage par les caspases, se transloque vers le noyau et déclenche la condensation de la chromatine ainsi que la fragmentation de l'ADN. Références associées : PMID:11278283, PMID:8566796, PMID:8816758

• Il s'agit d'un composant central de la voie de signalisation Hippo. Il forme un complexe avec SAV1 afin de phosphoryler et d'activer LATS1/2, qui phosphoryle et inactive à son tour YAP1 et WWTR1/TAZ, limitant ainsi la prolifération et favorisant l'apoptose. Références associées : PMID:15688006, PMID:16930133, PMID:23972470

• Phosphoryle NEK2 et participe à la disjonction des centrosomes en régulant la localisation de NEK2 au centrosome, ainsi que la phosphorylation ultérieure de CROCC et CEP250. Références associées : PMID:21076410, PMID:21723128

• En association avec SAV1, STK3/MST2 module l'activité transcriptionnelle d'ESR1 en influençant sa phosphorylation. Référence associée : PMID:21104395

• Régule positivement l'activation de RAF1 en supprimant la phosphorylation inhibitrice sur Ser-259. Référence associée : PMID:20212043

• Se localise dans le cytoplasme, le noyau et le centrosome ; est exprimé à des niveaux élevés dans les tissus adultes du rein, des muscles squelettiques et du placenta, et à de très faibles niveaux dans les tissus adultes du cœur, des poumons et du cerveau.

• Subit des modifications post-traductionnelles par acétylation et ubiquitination ; est classé comme une sérine/thréonine-protéine kinase impliquée dans l'apoptose et contient des domaines de liaison à l'ATP, de type coiled-coil et de liaison aux nucléotides.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène utilisé est un peptide synthétique correspondant à la région N-terminale (acides aminés 1-100) de STK3/MST2 humain. Lors de l'utilisation de cet anticorps sur des échantillons de souris, validez sa spécificité, car la réactivité croisée est confirmée, mais l'homologie de séquence peut varier légèrement.
• Cet anticorps convient au Western blot (WB), à l'immunofluorescence/immunocyt chimie (IF/ICC) et à l'ELISA. Pour le WB, envisagez d'utiliser des lysats cellulaires totaux provenant de lignées cellulaires humaines ou murines connues pour exprimer STK3/MST2, et veillez à optimiser correctement le blocage et la dilution de l'anticorps.
• Pour l'IF/ICC, les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées afin de détecter les pools nucléaires et cytoplasmiques de STK3/MST2. Comme STK3/MST2 peut se transloquer vers le noyau après clivage par les caspases, la surveillance des stimuli apoptotiques peut renforcer le signal nucléaire.
• Compte tenu de son rôle dans la disjonction des centrosomes, cet anticorps peut également être utile pour les études sur les centrosomes ; envisagez des protocoles appropriés de synchronisation cellulaire et la microscopie haute résolution.

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