Anticorps polyclonal anti-STING/TMEM173 (WB, IHC-P, ELISA) - Q3TBT3

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de STING/TMEM173

• Facilite la signalisation immunitaire innée en agissant comme un capteur de l’ADN cytosolique provenant des bactéries et des virus, et favorise la production d’interférons de type I (IFN-alpha et IFN-beta). Références associées : PMID:18818105 PMID:19433799 PMID:19776740
• Capteur de dinucléotides cycliques : se lie avec une forte affinité au second messager bactérien c-di-GMP et au cGAMP d’origine cellulaire (2',3'-cGAMP), déclenchant la signalisation en aval. Références associées : PMID:21947006 PMID:23258412 PMID:23519410
• Activation induite par un ligand : lors de la liaison au ligand, STING s’oligomérise, se déplace depuis le réticulum endoplasmique et est phosphorylé par TBK1 sur le motif pLxIS, ce qui entraîne le recrutement d’IRF3 et l’induction d’interférons de type I. Références associées : PMID:25636800 PMID:27324217 PMID:29973723
• Spécificité de liaison au cGAMP : est préférentiellement activé par le cGAMP lié en 2',3' en raison de sa conformation préorganisée, bien qu’il puisse se lier au cGAMP lié en 3'-3' avec une affinité plus faible. Références associées : PMID:26300263
• Fonction dans l’autophagie : favorise directement l’autophagie en bourgeonnant du réticulum endoplasmique dans des vésicules COPII, formant l’ERGIC, qui sert de source membranaire pour le recrutement de WIPI2 et la lipidation de LC3. Après une infection bactérienne, une réticulophagie induite par le c-di-GMP est également observée. Références associées : PMID:30568238 PMID:29056340
• Pourrait participer à la fonction du translocon et transmettre des signaux apoptotiques par association avec les molécules du CMH de classe II. Références associées : PMID:18559423
• Localisation subcellulaire : réside principalement sur la membrane du réticulum endoplasmique, mais se déplace dynamiquement vers l’ERGIC, l’appareil de Golgi, les autophagosomes, la membrane externe mitochondriale et la membrane cellulaire lors de son activation.
• Exprimé au niveau protéique dans les tissus lymphoïdes tels que la rate et le thymus, ainsi que dans les cellules dendritiques.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à un peptide C-terminal (aa 280-371), garantissant la reconnaissance de STING pleine longueur ainsi que d’isoformes potentielles telles que STING-beta. Vérifier la spécificité à l’aide d’échantillons issus de modèles knockout ou par blocage peptidique.
• Pour le Western blot, une bande attendue autour de 43 kDa devrait être observée. Il convient de garder à l’esprit que les modifications post-traductionnelles et l’épissage alternatif peuvent produire des bandes supplémentaires.
• Applications en IHC-P : les conditions optimales de récupération antigénique (récupération d’épitope induite par la chaleur avec un tampon citrate, pH 6,0, ou un tampon EDTA, pH 9,0) doivent être déterminées empiriquement. Les tissus témoins positifs comprennent la rate ou le thymus de souris ; tenir compte des profils de coloration nucléaire/périnucléaire et cytoplasmique.
• Pour l’ELISA, l’association avec un anticorps de capture dirigé contre un épitope distinct (par exemple N-terminal) peut être bénéfique pour les dosages sandwich. Valider la plage de concentrations de travail à l’aide de la protéine STING murine recombinante.
• L’anticorps présente une réactivité croisée avec les protéines STING humaines et de rat ; toutefois, il convient de confirmer l’homologie de séquence dans la région de l’immunogène et de valider les résultats dans le système d’échantillonnage concerné.

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