Anticorps polyclonal Anti-ST8SIA1 pour WB, ELISA - Q92185

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de ST8SIA1

• ST8SIA1 (Alpha-N-acétylneuraminide alpha-2,8-sialyltransférase), également connue sous le nom de GD3 synthase, est une glycosyltransférase qui ajoute de l'acide sialique en liaison alpha-2,8 au GM3 pour former le ganglioside GD3, une étape clé de la biosynthèse des gangliosides (PubMed:18348864, PubMed:22885356, PubMed:7937974). Références associées : PMID:18348864 PMID:22885356 PMID:7937974
• Elle peut étendre davantage le GD3 en GT3 et utilise des substrats comme le GM1b, le GD1a et le GT1b pour synthétiser des gangliosides complexes GD1c, GT1a et GQ1b (PubMed:8631981, PubMed:8706663). Références associées : PMID:8631981 PMID:8706663
• La protéine est ancrée dans la membrane de l'appareil de Golgi avec une topologie de type II, caractéristique des sialyltransférases, et possède une séquence signal d'ancrage et une hélice transmembranaire.
• L'épissage alternatif génère de multiples isoformes ; l'isoforme canonique a un poids moléculaire d'environ 40,5 kDa (UniProt : 40519 Da), tandis que le poids observé basé sur l'immunogène est de 41 kDa.
• ST8SIA1 est fortement exprimée dans les lignées cellulaires de mélanome, le cerveau adulte et fœtal, et dans une moindre mesure dans le poumon adulte et fœtal, ce qui correspond à son rôle dans les profils de gangliosides associés aux neurones et au cancer.
• Elle contient des ponts disulfure et des sites de glycosylation N-liés, qui sont critiques pour un repliement et une activité enzymatique appropriés dans l'appareil de Golgi.
• Dans les cellules de cancer du sein, elle peut synthétiser des dérivés inhabituels de lactosylcéramide tétra- et pentasialylés GQ3 et GP3, soulignant son rôle dans la glycosylation associée au cancer (PubMed:22885356). Références associées : PMID:22885356

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 49–270, une région dépourvue de domaine transmembranaire, suggérant une reconnaissance de l'anticorps pour le domaine catalytique soluble. Pour le WB, utilisez des conditions dénaturantes réductrices et un contrôle positif (par exemple, un lysat de cellules de mélanome) pour confirmer les bandes près de 41 kDa.
• En raison de la nature polyclonale, plusieurs isoformes ou modifications post-traductionnelles peuvent être détectées. Envisagez de traiter les échantillons avec de la PNGase F pour évaluer les décalages dépendants de la glycosylation.
• La réactivité croisée avec le ST8SIA1 de souris est spécifiée, permettant des études dans des modèles murins. Validez la réactivité spécifique à l'espèce dans le système d'échantillon pertinent avant les expériences à grande échelle.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; titrez-le de manière optimale contre le ST8SIA1 recombinant ou des extraits de gangliosides dérivés de cellules.

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