Anticorps polyclonal de lapin anti-SQSTM1 pour WB, ELISA - Q64337

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SQSTM1

• SQSTM1, également connu sous le nom de sequestosome-1 ou p62, est une protéine adaptatrice cytoplasmique inductible par le stress qui sert de récepteur d'autophagie sélective en reliant les agrégats de protéines ubiquitinées à la machinerie autophagique.
• Reconnaissance du cargo autophagique : En tant que récepteur d'autophagie sélectif, SQSTM1 fait le pont entre le cargo ubiquitiné et les autophagosomes. Il subit une séparation de phase liquide-liquide lors de sa liaison aux protéines ubiquitinées via son domaine UBA, formant des corps p62 qui sont ensuite recrutés vers les autophagosomes par l'interaction de son motif LIR avec les protéines de la famille ATG8, conduisant à la dégradation autophagique du cargo. Références connexes : PMID:25723488, PMID:33397898
• Signalisation cytoprotectrice : SQSTM1 interagit avec KEAP1, l'enfermant dans des corps d'inclusion et empêchant ainsi la dégradation médiée par KEAP1 de NFE2L2/NRF2. Cela conduit à l'accumulation nucléaire de NRF2 et à l'expression de gènes antioxydants et cytoprotecteurs. Références connexes : PMID:20173742, PMID:20421418, PMID:24011591
• Régulation de la voie NF-kappa-B : SQSTM1 agit comme un adaptateur médiant l'interaction entre TRAF6 et CYLD, influençant ainsi l'activation de NF-kappa-B en réponse à des cytokines telles que TNF, NGF et l'interleukine-1. Références connexes : PMID:14960283, PMID:18382763
• Localisation subcellulaire : SQSTM1 se localise dans les agrégats cytoplasmiques (corps p62), les autophagosomes, les endosomes tardifs, les lysosomes et le noyau (corps PML). On le trouve également au niveau du réticulum endoplasmique et des sarcomères des myofibrilles, reflétant ses fonctions diverses dans le contrôle de qualité des protéines et la signalisation.
• Modifications post-traductionnelles et caractéristiques structurelles : La protéine est sujette à l'acétylation, la phosphorylation, l'ubiquitination et la palmitoylation, et contient des domaines à doigts de zinc. Ces modifications régulent son activité, sa localisation et sa stabilité.
• Distribution tissulaire : SQSTM1 est largement exprimé dans les tissus, ce qui est cohérent avec ses rôles fondamentaux dans l'homéostasie cellulaire et les réponses au stress.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 250-350 du SQSTM1 de souris, une région qui peut inclure des parties du domaine PB1 et des séquences de liaison. La nature polyclonale de cet anticorps peut lui permettre de reconnaître plusieurs épitopes, fournissant un signal robuste en Western blot (WB).
• Pour le WB, une bande proche de 48 kDa est attendue, mais en raison de la tendance de SQSTM1 à former des agrégats et à subir des modifications post-traductionnelles, des espèces de poids moléculaire plus élevé peuvent également apparaître. Pour minimiser l'agrégation, chauffez les échantillons dans un tampon de charge réducteur avant l'électrophorèse.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser la protéine SQSTM1 recombinante ou le peptide d'immunisation comme antigène de revêtement. La titration de l'anticorps et de l'antigène est recommandée pour un rapport signal/bruit optimal.
• La réactivité croisée avec l'humain, la souris et le rat est soutenue par l'homologie de séquence ; cependant, une validation individuelle dans l'échantillon et l'application spécifiques est suggérée.

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