Anticorps monoclonal de lapin anti-SQS/FDFT1 pour WB, ELISA - P37268

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SQS/FDFT1

• La squalène synthase (SQS), codée par le gène FDFT1, est une enzyme à double fonction qui catalyse la première étape déterminante de la biosynthèse des stérols, produisant du squalène à partir de deux molécules de farnésyl pyrophosphate (FPP).
• La réaction se déroule en deux demi-réactions distinctes : d'abord la formation de diphosphate de présqualène (PSQPP) à partir de deux FPP, puis l'hétérolyse, l'isomérisation et la réduction dépendante de NADPH/NADH pour obtenir du squalène.
• En tant que première enzyme déterminante de la voie de biosynthèse du cholestérol, la SQS joue un rôle essentiel dans la régulation des niveaux intracellulaires de cholestérol et constitue un point de contrôle clé de l'homéostasie des stérols.
• L'épissage alternatif de FDFT1 produit plusieurs isoformes ; l'isoforme canonique se localise sur la membrane du réticulum endoplasmique via une hélice transmembranaire C-terminale.
• Largeement exprimée dans tous les tissus humains, l'activité de la SQS est particulièrement importante dans le foie, l'intestin et les organes stéroïdogènes, où la synthèse du cholestérol est élevée.
• Les modifications post-traductionnelles et les caractéristiques structurelles incluent une activité dépendante du magnésium, la liaison au cofacteur NAD(P) et un mécanisme catalytique impliquant plusieurs sites de liaison aux métaux.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à un peptide interne (aa 150-250) de la SQS/FDFT1 humaine, ce qui suggère que l'anticorps peut reconnaître des épitopes conservés entre les espèces ; confirmez la spécificité dans le modèle expérimental concerné.
• Pour le Western blotting, le poids moléculaire attendu est d'environ 48 kDa ; pensez à utiliser des contrôles positifs appropriés (par exemple des lysats de cellules hépatiques ou HeLa) et validez l'identité de la bande avec des échantillons knock-down ou knock-out.
• Pour les applications ELISA, il est recommandé d'optimiser la concentration de l'anticorps et les conditions de blocage pour minimiser le bruit de fond ; la réactivité croisée avec la SQS de souris et de rat peut faciliter les études translationnelles mais doit être vérifiée indépendamment.
• La SDS-PAGE en conditions réductrices et non réductrices peut avoir un impact sur la détection ; standardisez les conditions de gel et les protocoles de transfert sur membrane pour obtenir des résultats cohérents.

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