Anticorps monoclonal de lapin anti-SPINK5/LEKTI pour WB, ELISA - Q9NQ38

Caractéristiques et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SPINK5/LEKTI (Inhibiteur de sérine protéase de type Kazal 5)

• SPINK5 (Serine Peptidase Inhibitor Kazal Type 5) code pour l'inhibiteur de sérine protéase LEKTI (Lympho-Epithelial Kazal-Type-related Inhibitor), une protéine sécrétée multidomaine appartenant à la famille des inhibiteurs de sérine protéase de type Kazal. Elle contient de multiples domaines Kazal et des ponts disulfure, avec un poids moléculaire d'environ 121 kDa.
• LEKTI agit comme un régulateur clé de l'activité protéasique dans la peau et les épithéliums muqueux, inhibant les kallikréines (KLK5, KLK7, KLK14), la caspase-14 (CASP14) et la trypsine de manière dépendante du pH. Cette inhibition est cruciale pour maintenir la barrière protectrice de la peau et contrôler la desquamation et l'inflammation.
• La protéine est fortement exprimée dans le thymus et la couche cornée de la peau, avec une détection supplémentaire dans la muqueuse buccale, la glande parathyroïde, les glandes de Bartholin, les amygdales et l'épithélium vaginal. Elle est présente à des niveaux très faibles dans les poumons, les reins et la prostate.
• LEKTI est une protéine sécrétée qui subit un traitement protéolytique, incluant un clivage au niveau de résidus basiques appariés, générant de multiples fragments actifs. Son épissage alternatif produit des isoformes distinctes.
• En raison de son rôle dans l'inhibition des protéases pro-inflammatoires et pro-desquamantes, LEKTI contribue à la défense antimicrobienne et prévient une dégradation tissulaire excessive ; les mutations de SPINK5 sont associées au syndrome de Netherton, caractérisé par de graves défauts de la barrière cutanée.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 100–200 de SPINK5/LEKTI humain (Q9NQ38), situé dans la région N-terminale. Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser des lysats cellulaires totaux provenant de tissus à forte expression de LEKTI (par ex., peau, thymus) ou des contrôles de protéine recombinante pour valider la spécificité de l'anticorps. Le poids moléculaire prédit est d'environ 121 kDa, mais des fragments traités peuvent également être détectés.
• Pour les applications ELISA, cet anticorps monoclonal peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection pour quantifier les niveaux de LEKTI dans les fluides biologiques ou les extraits tissulaires. Assurez-vous une optimisation appropriée des concentrations de revêtement et des conditions de blocage.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat indique une conservation de l'épitope, mais un alignement de séquence de la région immunogène entre les espèces est recommandé pour confirmer la liaison potentielle. Validez l'anticorps dans le système d'échantillon pertinent pour votre configuration expérimentale.
• Étant donné l'activité dépendante du pH de LEKTI, considérez l'effet du pH sur la liaison anticorps-antigène si vous développez des tests dans des conditions tampon différentes.

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