Anticorps Monoclonal Anti-Glycoprotéine Spike pour WB, IF/ICC, ELISA - P0DTC2

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la Glycoprotéine Spike

• La glycoprotéine Spike (S) est une protéine de fusion virale de classe I responsable de la médiation de l'entrée du SARS-CoV-2 dans les cellules hôtes.
• La protéine S s'attache à la cellule hôte en interagissant avec le récepteur de l'enzyme de conversion de l'angiotensine 2 (ACE2), initiant l'infection (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086). Références associées : PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• Le clivage protéolytique au site S2/S2' par les protéases hôtes TMPRSS2 ou la cathepsine L déclenche des changements conformationnels irréversibles, conduisant à la fusion des membranes virales et cellulaires (PubMed:32142651, PubMed:32703818, PubMed:34159616, PubMed:34561887). Références associées : PMID:32142651, PMID:32703818, PMID:34159616, PMID:34561887
• Les récepteurs alternatifs d'entrée dans l'hôte comprennent la neuropiline-1/2 (NRP1/NRP2) et le récepteur de l'asialoglycoprotéine 1 (ASGR1), ce qui peut expliquer le tropisme pour les cellules de l'épithélium olfactif et les voies indépendantes de l'ACE2 (PubMed:33082294, PubMed:33082293, PubMed:34837059). Références associées : PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:34837059
• La protéine contient des régions en hélice superhélicoïdale (coiled-coil), des ponts disulfure et est fortement glycosylée, ce qui est cohérent avec son rôle de glycoprotéine de fusion de l'enveloppe virale.
• La localisation subcellulaire comprend la membrane du virion, le compartiment intermédiaire entre le réticulum endoplasmique et l'appareil de Golgi de l'hôte, et la membrane cellulaire de l'hôte.
• Elle contribue à l'évasion immunitaire virale en inhibant les réponses immunitaires innées de l'hôte et en contrecarrant la restriction exercée par la tetherine (BST-2).
• Le domaine de tige (stalk) de S contient trois charnières, offrant une liberté d'orientation inattendue au domaine de la tête, ce qui facilite probablement la liaison au récepteur (PubMed:32817270). Références associées : PMID:32817270

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• L'immunogène a été élevé contre un fragment recombinant de la protéine 3CLpro ; la réactivité croisée potentielle avec la glycoprotéine spike (P0DTC2) doit être validée dans votre contexte d'essai spécifique.
• Pour le transfert Western (Western blotting, WB), une bande proche de 141 kDa est attendue dans des conditions réductrices ; optimisez la préparation des échantillons et la dilution de l'anticorps pour minimiser la liaison non spécifique.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), envisagez d'utiliser une fixation à la paraformaldéhyde à 4 % et une perméabilisation au Triton X-100 à 0,1 % ; incluez des témoins appropriés pour confirmer la spécificité de la coloration.
• Pour les applications ELISA, titrez à la fois l'anticorps et l'antigène pour obtenir un rapport signal/bruit robuste ; la réactivité croisée avec d'autres protéines coronavirales peut nécessiter une évaluation.

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